黃芪注射液對大鼠睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：睪丸扭轉(zhuǎn)是臨床急癥，好發(fā)于青春期前后的青少年，需行睪丸早期復(fù)位以挽救睪丸，然而，復(fù)位后常出現(xiàn)不同程度的睪丸萎縮乃至生精功能低下已成為亟待解決的問題。近來研究發(fā)現(xiàn)生精功能損傷與復(fù)位后再灌注睪丸中活性氧的產(chǎn)生所致，活性氧族包括過氧化氫(H<,2>O<,2>)、羥基(-OH)、超氧基團(tuán)(O<,2><'->)等，它們引起細(xì)胞膜和線粒體膜脂質(zhì)過氧化，從而破壞膜的完整性，增加膜的通透性，進(jìn)而引起睪丸生精細(xì)胞損傷及凋亡<'[1]>。扭轉(zhuǎn)一側(cè)睪丸

2、除了造成患側(cè)組織的直接損傷以外，還會導(dǎo)致對側(cè)睪丸的交感性損傷<'[2]>。對側(cè)睪丸損傷的機(jī)制可能與對側(cè)睪丸的缺血再灌注、免疫因素、神經(jīng)體液因素、血睪屏障有關(guān)。本實驗通過睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位動物模型的建立，旨在探討黃芪注射液對Wistar雄性大鼠睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位后的保護(hù)作用，以研究缺血再灌注(Ischemia-reperfusion)損傷過程中相關(guān)酶及產(chǎn)物等生化指標(biāo)的變化，以及生精細(xì)胞凋亡情況的變化，為臨床工作中的睪丸扭轉(zhuǎn)患者減輕睪丸損傷及保護(hù)生精功

3、能提供一定的實驗依據(jù)和理論依據(jù)。 方法：40只成年(6-8周)健康Wistar雄性大鼠隨機(jī)分為睪丸扭轉(zhuǎn)假手術(shù)對照組(A組)、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組(B組)、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組(C組)、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組(D組)4個組，每組10只。建立單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位模型。單側(cè)睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位模型采用Tumer 法<'[3]>建立：2％戊巴比妥鈉(50mg/kg)腹腔注射麻醉后，下腹小切口，游離左側(cè)睪丸，切斷睪丸引帶，分離周圍

4、筋膜至附睪頭。A組：左側(cè)陰囊切開，游離暴露睪丸，依扭轉(zhuǎn)模型隨意搬動，但不予扭轉(zhuǎn)，陰囊縫合關(guān)閉。B組：左側(cè)睪丸順時針繞精索旋轉(zhuǎn)720°，肉膜白膜縫合固定以防止自動復(fù)位，陰囊縫合。扭轉(zhuǎn)6h后復(fù)位固定。C組：方法同B組，于扭轉(zhuǎn)復(fù)位前30min(即扭轉(zhuǎn)后5.5h)腹腔注射黃芪注射液(3g/kg)。D組：方法同B組，除于扭轉(zhuǎn)復(fù)位前 30min 腹腔注射黃芪注射液外，還分別于術(shù)后第1天、第2天、第3天腹腔注射黃芪注射液(lg/kg)。扭轉(zhuǎn)復(fù)位術(shù)后7

5、天切取雙側(cè)睪丸分別留取組織勻漿和石蠟切片的標(biāo)本待檢測。睪丸組織石蠟包埋切片用末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的脫氧尿嘧啶三磷酸原位缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測生殖細(xì)胞凋亡，光鏡下每張切片選取5個視野(×200)，計數(shù)100個細(xì)胞，求得陽性細(xì)胞百分率得到凋亡指數(shù)?；瘜W(xué)比色法測定睪丸組織的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。 以上結(jié)果均采用X±s表示，所有數(shù)據(jù)均在微機(jī)上采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。采用方法

6、：方差齊性檢驗、單因素方差分析，P值<0.05定為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果：雙側(cè)睪丸均顯示：1睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組比較：SOD含量明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；MDA含量明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)；生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)。 2 睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組比較：SOD含量明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；MDA 含

7、量明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)；生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)。 3 扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組與睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組比較SOD含量明顯升高，差異有顯著性(P<0.05)；MDA含量明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)；生精細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)。 4 睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位組、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+單次黃芪注射液治療組、睪丸扭轉(zhuǎn)復(fù)位+多次黃芪注射液治療組與