前列腺素E1治療糖尿病腎病的細(xì)胞因子及凋亡機(jī)制研究.pdf

1、目的：首先通過臨床研究觀察前列腺素E1(PGE1)對糖尿病腎病(DN)患者尿蛋白，尿微量白蛋白的短期與長期影響，并比較其與血管緊張素酶抑制劑(ACEI)治療效果的差異。然后通過動物實(shí)驗(yàn)觀察PGE1對DN大鼠血漿及腎皮質(zhì)內(nèi)皮素-1（ET-1）、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)水平，腎組織細(xì)胞凋亡的影響：(1)觀察PGE1治療DN的療效(2)探討PGE1治療DN的可能機(jī)制(3)尋找一個(gè)治療DN療效快而持久的治療方案。
　　 方法：1、臨床研

2、究：根據(jù)Mogensen糖尿病腎病診斷標(biāo)準(zhǔn)，對DN患者進(jìn)行分期，分為Ⅲ、Ⅳ（早期、中期、晚期）、V期。各期患者再隨機(jī)分為4組：PGE1組、ACEI組、PGE1+ACEI組和對照組。治療過程：①PGE1組：每天給予凱時(shí)10μg靜推，共15天；②ACEI組：每天給予洛汀新10mg口服，共18個(gè)月；③PGE1+ACEI組：同時(shí)給予凱時(shí)和洛汀新治療，用藥劑量及時(shí)間同上；④對照組：不給凱時(shí)或洛汀新治療，只給常規(guī)的降糖、降脂等治療。療效評估：測定各

3、組治療前及治療后15天、6個(gè)月、18個(gè)月時(shí)24h尿蛋白和24h尿微量白蛋白水平。
　　 2、動物實(shí)驗(yàn)：雄性Wistar大鼠55只，單次腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)50mg/kg制備DN大鼠模型。將造模成功46只大鼠隨機(jī)分為：PGE1組、ACEI組、PGE1+ACEI組和腎病對照組，另設(shè)正常對照組10只。實(shí)驗(yàn)過程：①PGE1組：每天給予凱時(shí)10μg尾靜脈靜推，共10天；②ACEI組：每天給予洛汀新10mg灌胃，共8個(gè)周；③PGE1

4、+ACEI組：同時(shí)給予凱時(shí)和洛汀新治療，用藥劑量及時(shí)間同上；④對照組：兩對照組給予相同體積的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)評估：①24小時(shí)尿白蛋白定量②血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)③腎臟肥大指數(shù)④HE染色觀察腎臟病理形態(tài)⑤測定血漿及腎皮質(zhì)ET-1、AngⅡ水平⑥TUNEL原位凋亡檢測
　　 結(jié)果：1、臨床研究：(1)治療后15天，各期PGE1+ACEI組和PGE1組患者的尿蛋白及尿微量白蛋白均較治療前顯著下降（P＜0.01）且療效明顯好

5、于ACEI對照組(P＜0.01)。(2)治療后6個(gè)月，Ⅲ、Ⅳ期PGE1+ACEI組和PGE1組上述指標(biāo)與治療后15天相似。V期PGE1+ACEI組較治療前下降(P＜0.05)，但PGE1組和ACEI對照組與治療前無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。(3)治療后18個(gè)月，Ⅲ期和Ⅳ早期各治療組上述指標(biāo)仍較治療前有顯著下降(P＜0.01)；Ⅳ中、晚期PGE1+ACEI組上述指標(biāo)仍較治療前下降(P＜0.01或P＜0.05)且療效好于ACEI對照組(P

6、＜0.01或P＜0.05)，Ⅳ晚期PGE1組尿蛋白較治療前升高(P＜0.05)；V期各治療組均較治療前升高(P＜0.01)。
　　 2、動物實(shí)驗(yàn)(1)24小時(shí)尿白蛋白定量：與正常對照組(N組)比較，各模型組大鼠尿白蛋白水平明顯升高。治療后，各治療組尿白蛋白水平均低于腎病對照組（DN組）(P＜0.01)。治療后10天，PGE1組和PGE1+ACEI組尿白蛋白明顯低于ACEI組(P＜0.01)，治療后8周，PGE1+ACEI組水平最

7、低(P＜0.05)，PGEI組略高于ACEI組(P＜0.05)。(2)腎臟肥大指數(shù)、BUN、Scr、ET-1、AngⅡ水平：DN組的腎臟肥大指數(shù)、BUN、Scr、ET-1、AngⅡ水平明顯高于N組(P＜0.01)；與DN組比較，各治療組上述指標(biāo)水平均降低（P＜0.01或P＜0.05），其中PGE1+ACEI組水平最低（P＜0.01或P＜0.05）；此外， ET-1、AngⅡ水平的組間差異在腎皮質(zhì)(P＜0.01)比血漿(P＜0.05)更明

8、顯。(3)病理檢查：與N組比較，DN組多數(shù)腎小球腫脹，基底膜增厚，系膜細(xì)胞增生；部分腎小管出現(xiàn)上皮細(xì)胞腫脹，管腔變窄。與DN組比較，各治療組上述病理變化減輕，PGE1+ACEI組病理表現(xiàn)最佳。(5) TUNEL檢測：細(xì)胞凋亡在腎小球區(qū)域不明顯，各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞o.05)；凋亡細(xì)胞主要位于腎小管區(qū)。各模型組腎小管凋亡細(xì)胞數(shù)均明顯高于N組(P＜0.01)；與DN組比較，各治療組腎小管凋亡細(xì)胞數(shù)降低(P＜o(jì).01)，PGE1+ACEI