膳食與大鼠肝組織AMPK表達(dá)及肥胖的關(guān)系.pdf

1、目的：以SD大鼠為研究對(duì)象，探討高脂膳食與大鼠肥胖及AMPK表達(dá)的關(guān)系，以及高脂膳食誘導(dǎo)的肥胖大鼠低脂膳食干預(yù)后體重的變化與肝組織AMPK表達(dá)水平的關(guān)系，探討膳食影響肥胖的可能機(jī)制。 方法： ①建立肥胖模型：將36只初始體重為160～170g的雄性大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后，隨機(jī)選取9只喂以基礎(chǔ)飼料，作為對(duì)照組(CF)其余27只喂以高脂飼料15w后，產(chǎn)生14只飲食誘導(dǎo)肥胖大鼠(DIO)和7只飲食誘導(dǎo)肥胖抵抗大鼠(DIO-R)。

2、 ②低脂膳食干預(yù)實(shí)驗(yàn)：將DIO組再隨機(jī)分為2組，1組繼續(xù)喂以高脂飼料(DIO-HF，7只)，另一組則改喂基礎(chǔ)低脂飼料(DIO-HF/CF，7只)，CF及DIO-R大鼠維持原飼料，繼續(xù)喂養(yǎng)8w。整個(gè)23w的喂養(yǎng)期間每日觀察大鼠一般情況，記錄給食量和撒食量，計(jì)算進(jìn)食量，每周稱(chēng)體重。 ③分別于0w、15w末和23w末過(guò)夜禁食10h后，于次晨采尾血(0w、15w末)或斷頭取血(23w末)，分離血漿，置‐20℃冰箱保存，以備血糖、

3、血脂和胰島素水平測(cè)定。 ④分離大鼠固定部位的肝組織，置液氮凍存后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱保存，以備用逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）測(cè)定AMPKα1，α2 mRNA的表達(dá)水平，以及用免疫印跡（Western Blot）方法測(cè)定AMPKα及p-AMPKα蛋白的表達(dá)水平。 ⑤分離腹腔睪周（睪丸周?chē)?、腎周和腰周部位脂肪組織并準(zhǔn)確稱(chēng)

4、重。 結(jié)果：在第15周末，DIO大鼠體重、脂肪濕重、脂體比、熱能攝入量、空腹血糖（FBG）、胰島素（FINS）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）等指標(biāo)與對(duì)照組和DIO-R大鼠相比均有顯著性差異（P<0.05），DIO-R大鼠與對(duì)照組相比，除空腹血糖（FBG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）有差異外（P<0.05），其余指標(biāo)均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。低脂干預(yù)8W后，DIO-HF/CF組體

5、重、脂肪濕重、脂體比、食物和熱能攝入量、空腹血糖（FBG）、胰島素（FINS）、總膽固醇（TC）等指標(biāo)與DIO-HF組相比均有顯著性差異（P<0.05）；DIO-R組與CF組相比，除空腹血糖（FBG）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）有顯著性差異外，其余指標(biāo)均無(wú)顯著性差異（P>0.05）。DIO-HF組肝組織AMPKα2 mRNA水平顯著降低(P<0.05),而AMPKα1的mRNA水平未見(jiàn)明顯改變。 DIO-HF組AMPK及p-AMP

6、K的蛋白表達(dá)水平均顯著降低(均P<0.05),而其余3組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 結(jié)論： ①含熱量19.33kJ/g的高脂飼料對(duì)SD大鼠具有致肥胖作用，對(duì)肥胖大鼠改用熱量13.77kJ/g的低脂膳食喂養(yǎng)可降低肥胖大鼠的體重。 ②同種系、同性別大鼠對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖易感性存在顯著的個(gè)體差異。 ③肥胖的發(fā)生可能與體內(nèi)AMPK的表達(dá)有關(guān)。膳食成分可影響肝組織AMPK的表達(dá)。長(zhǎng)期高脂飲食下調(diào)AMP

7、Kα2 mRNA的表達(dá)以及AMPKα和p-AMPKα蛋白的表達(dá)。肥胖敏感大鼠改用基礎(chǔ)膳食可糾正高脂膳食導(dǎo)致的AMPK下調(diào)并使體重降低，肥胖抵抗可能與AMPK維持正常表達(dá)有關(guān)。 創(chuàng)新點(diǎn)：腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是一種能被腺苷一磷酸 AMP激活的蛋白激酶，它在食物攝取和能量消耗過(guò)程中起著重要的作用。AMPK通過(guò)抑制脂肪合成的主要酶乙酰輔酶A羧化酶(ACC)來(lái)抑制脂肪合成代謝，促進(jìn)脂肪分解代謝。目前，AMPK正成為國(guó)內(nèi)外研究的熱