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文檔簡介
1、本研究分為二部分:
第一部分、高脂飲食誘導肥胖大鼠模型的建立
目的:通過高脂飲食來制備肥胖大鼠模型。
方法:選用80只雄性成年SD大鼠,適應性喂養(yǎng)1周后,按體重隨機分為基礎(chǔ)對照組(10只/組),高脂組(70只/組),每籠3只喂養(yǎng)12周,自由飲水,每天上午8點定時喂給飼料。對照組喂以基礎(chǔ)飼料(脂肪供能比為17.2%),高脂組喂以高脂飼料(脂肪供能比為42.9%,含豬油18%)。自由攝食,記錄每天每
2、籠大鼠的給食量和撒食量,確定實際攝入量。對照組與高脂組除脂肪,淀粉含量有所差異以外,蛋白質(zhì),無機鹽,纖維素,維生素等其他營養(yǎng)素的攝入量相同。所有大鼠每周定時稱體重,分別于0,4,8,12周末過夜禁食10小時后,于次日上午9點采尾血,分離血清,置于-80℃冰箱冷凍保存,以備血清學指標的測定。
結(jié)果:飼養(yǎng)12周后,以高脂組大鼠體重高于對照組大鼠平均體重加1.4倍標準差為標準來確定實驗性肥胖大鼠,篩選出的符合標準的肥胖大鼠34只
3、繼續(xù)進行下一階段的實驗,造模成功率為48.6%。
結(jié)論:以含豬油18%、脂肪供能比為42.9%的高脂飼料喂養(yǎng)大鼠12周可成功制備肥胖大鼠模型。
第二部分、膳食調(diào)整對大鼠脂聯(lián)素水平的調(diào)節(jié)
目的:觀察研究對高脂飲食誘導的肥胖大鼠采取降脂、調(diào)整脂肪酸構(gòu)成和限能等膳食調(diào)整干預措施后大鼠體重、血糖、血脂、血胰島素水平、內(nèi)臟脂肪組織脂聯(lián)素mRNA表達及血清脂聯(lián)素水平的變化,并分析其在肥胖及糖脂代謝改善中所起
4、的作用。為該類疾病防治提供新的思路和科學依據(jù)。
方法:造模階段的對照組繼續(xù)以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng),實驗性肥胖大鼠則按體重隨機分為高脂組,降脂組,降脂+調(diào)脂組,降脂+調(diào)脂+限能組繼續(xù)喂養(yǎng)8周。限能組單籠喂養(yǎng),其他各組每籠3只喂養(yǎng),自由飲水,每天上午定時喂給飼料。除限能組外,各組大鼠自由進食,記錄每天每籠大鼠的給食量和撒食量,確定實際攝入量。限能組的每日給食量為基礎(chǔ)對照組上一日平均攝食量的80%,其減少量為淀粉含量,確保限能組除熱能外
5、,蛋白質(zhì)、脂肪、無機鹽、纖維素、維生素等其他營養(yǎng)成分的攝入量和自由攝食組相同。于16周末過夜禁食10小時后,于次日上午9點采尾血,分離血清,置于-80℃冰箱保存,以備血清學指標的測定。20周后斷頭處死,取全血,分離血清,置于-80℃冰箱保存;取內(nèi)臟脂肪,肝臟,腎臟的器官,液氮冷凍后置于-80℃冰箱保存。測量血脂,血糖,血胰島素等血清學指標。以實時定量RT-PCR測定大鼠內(nèi)臟脂肪組織脂聯(lián)素基因表達水平,以酶聯(lián)免疫分析法測定血清脂聯(lián)素水平。
6、
結(jié)果:
1.經(jīng)過8周的膳食結(jié)構(gòu)調(diào)整,限能組的體重,內(nèi)臟脂肪含量與高脂組及其余調(diào)整組相比均明顯降低(P<0.05),更接近對照組的水平,降脂組,調(diào)脂組與高脂組相比有所改善,但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
2.降脂、調(diào)脂、限能均能降低肥胖大鼠血清甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白水平,提高高密度脂蛋白水平,降低血糖、血清胰島素水平,但以限能組最為明顯(P<0.05),降脂組、調(diào)脂組次之。
7、 3.對照組,高脂喂養(yǎng)組血清脂聯(lián)素水平呈逐漸降低趨勢,而降脂、調(diào)脂組、限能組脂聯(lián)素水平呈逐漸升高趨勢,其中限能組升高最為明顯(P<0.05)。
4 實時定量PCR結(jié)果顯示,經(jīng)8周膳食調(diào)整干預,降脂組,限能組脂肪組織中脂聯(lián)素表達水平顯著高于繼續(xù)高脂喂養(yǎng)組(P<0.05),但調(diào)脂組脂聯(lián)素表達水平低于高脂組,原因有待進一步分析。
結(jié)論:限能,降脂,調(diào)脂能夠提高肥胖大鼠脂肪組織脂聯(lián)素表達和血清脂聯(lián)素水平,對于TG,
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