FoXO3a通路調(diào)控失神經(jīng)肌萎縮的作用機制及銀杏葉提取物的治療作用.pdf

1、目的：觀察銀杏葉提取物(EGB761)在實驗性大鼠失神經(jīng)肌萎縮中的治療效果，探討銀杏葉提取物對大鼠腓腸肌細胞中FoxO3a/MAFbx信號通路的影響。
　　 方法：選用成年雌性Wistar大鼠54只，體重200±10g，每組六只，隨機分為3組即失神經(jīng)組（A組，24只），藥物干預(yù)組（B組，24只）和正常對照組（C組，6只）。A組和B組大鼠應(yīng)用l0％水合氯醛（2ml/Kg體重）行腹腔內(nèi)注射麻醉，取其下肢股后側(cè)切口暴露雙側(cè)坐骨神經(jīng)，左

2、側(cè)行假手術(shù)，右側(cè)于距梨狀肌下孔1cm處，切斷坐骨神經(jīng)約0.7cm-1.0cm，近端翻轉(zhuǎn)180°于周圍組織進行縫合，造成右下肢腓腸肌失神經(jīng)支配模型。藥物干預(yù)組每日銀杏葉提取物（100mg/Kg體重）灌胃，在失神經(jīng)第2、7、14、28天分別處死大鼠取其兩側(cè)腓腸肌，分別稱肌肉濕重后快速置于-80℃冰箱凍存，備用。正常對照組C組不做任何處理，手術(shù)當(dāng)天（術(shù)后6小時）麻醉下分離雙側(cè)腓腸肌，記為術(shù)后第0天。分別求出肌濕重比；以WESTBLOT檢測右腓

3、腸肌標本中p-FoxO3aS253，F(xiàn)oxO3a，MAFbx蛋白的表達量；RT-PCR檢測FoxO3a，，MAFbXmRNA的表達量。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理各組數(shù)據(jù)，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示，各組之間的差異用One-way ANOVA分析，組間比較用t檢驗，p＜0.05差異具有統(tǒng)計學(xué)意義
　　 結(jié)果：本研究證實大鼠腓腸肌失神經(jīng)支配后肌濕重比下降，銀杏葉提取物灌胃治療后，與正常對照組比較，肌濕重比雖降低，但藥物干預(yù)組各

4、組肌濕重比高于相同時間點失神經(jīng)組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。藥物干預(yù)組FoxO3a基因表達和蛋白表達較失神經(jīng)組減少，在7，14，28天差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。藥物干預(yù)后p-FoxO3aS253的磷酸化水平顯著高于同期失神經(jīng)組。藥物干預(yù)組MAFbx基因和蛋白表達較失神經(jīng)組下降，在第7、14、28天差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 結(jié)論：大鼠失神經(jīng)骨骼肌萎縮早期，銀杏葉提取物可能是通過FoxO3a通路