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文檔簡介
1、胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤(solid-pseudopapillary neoplasm,SPN)是一種好發(fā)于年輕女性、具侵襲性生長方式的低度惡性腫瘤,目前暫被WHO歸入胰腺外分泌腫瘤。SPN的臨床病理特征與其生物學(xué)行為的相關(guān)性仍存在爭議,同時SPN的診斷因其形態(tài)學(xué)多樣性常很困難,容易和包括胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫痛在內(nèi)的其它腫瘤相混淆,現(xiàn)有的免疫標(biāo)記在其鑒別診斷中尚存缺陷;另外SPN的組織學(xué)來源和病理發(fā)生機(jī)制仍不清楚。本課題旨在分析SPN臨床病理特征
2、與其生物學(xué)行為的相關(guān)性,尋找新的有確診意義的診斷與鑒別診斷標(biāo)記,同時闡明SPN的組織學(xué)來源,并探討其與性激素相關(guān)的發(fā)生機(jī)制及與其侵襲性行為的關(guān)系,為其診斷和治療提供新的形態(tài)、免疫和分子基礎(chǔ)。
第一部分胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤臨床病理特征及生物學(xué)行為探討
背景和目的:胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤(SPN)是一種具有侵襲性生長方式的低度惡性腫瘤,雖然有較好的預(yù)后,仍有少數(shù)轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)病例,甚至死亡。本研究旨在建立SPN的臨床病理學(xué)特征與其侵
3、襲性生物學(xué)行為之間的相關(guān)性,尋找能預(yù)測其預(yù)后的相關(guān)因素。
方法:總結(jié)74例病例的臨床病理資料及鏡下病理特征,分析這些特征與SPN侵襲性生物學(xué)行為的相關(guān)性。
結(jié)果:SPN的侵襲性與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、癥狀無相關(guān)性,與浸潤胰腺、神經(jīng)侵犯、血管侵犯、漸進(jìn)性壞死巢及腫瘤細(xì)胞多形性、核分級也無關(guān),僅與腫瘤大小及核分裂數(shù)相關(guān)。
結(jié)論:腫瘤大小及核分裂是判斷SPN侵襲性生物學(xué)行為的可靠指標(biāo)。
第二部分胰腺
4、實(shí)性假乳頭腫瘤診斷及鑒別診斷標(biāo)記的篩選
背景和目的:胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤(SPN)形態(tài)學(xué)及免疫表型的多樣性,導(dǎo)致SPN與胰腺原發(fā)其它類型的腫瘤鑒別有時顯得相當(dāng)困難,特別是對穿刺活檢的標(biāo)本。本研究旨在分析不同免疫學(xué)標(biāo)記對SPN的診斷及鑒別診斷價值,篩選有確診意義的免疫標(biāo)記。
方法:分別制作55例SPN、51例胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤(pancreatic neuroendocrinetumor,P-NET)和54例胰腺腺癌(p
5、ancreatic adenocarcinoma,PAC)的組織芯片(tissue microarray,TMA),另收集19例SPN、6例胰腺腺泡細(xì)胞癌(acinar cellcarcinoma,ACC)、1例胰母細(xì)胞瘤(pancreatoblastoma,PB)的手術(shù)標(biāo)本,用免疫組織化學(xué)方法檢測CD99、E-eadherin、β-catenin、P120以及其它普遍用于輔助SPN診斷的免疫學(xué)標(biāo)記在以上各類腫瘤中的表達(dá)情況。
6、 結(jié)果:CD99在所有的SPN腫瘤細(xì)胞中均顯示出獨(dú)特的核旁點(diǎn)狀著色,40例P-NET(78.4%)示CD99細(xì)胞膜或膜漿陽性著色,4例PAC(7.4%)及1例(100%)PB表現(xiàn)出CD99弱膜陽性,所有ACC病例都不表達(dá)CD99。所有SPN細(xì)胞均不表達(dá)E-cadherin,β-catenin呈核漿強(qiáng)陽性染色,46例(90.2%)P-NET、52例(96.3%)PAC、6例(100%)ACC、1例(100%)PB示腫瘤細(xì)胞E-cadher
7、in膜表達(dá);所有51例P-NET、54例PAC、6例ACC、1例PB均示腫瘤細(xì)胞β-catenin膜表達(dá)。59例(79.7%)SPN為P120胞質(zhì)著色,6例(8.1%)示包膜著色;38例(74.5%)P-NET為P120胞質(zhì)表達(dá),8例(15.7%)示胞膜表達(dá);PAC、ACC、PB中分別有48例(88.9%)、5例(83.3%)、1例(100%)腫痛細(xì)胞胞膜表達(dá)P120,未見胞質(zhì)表達(dá)。其它標(biāo)記中,71例(95.9%)SPN、19例(37.
8、2%)P-NET、4例(7.4%)PAC表達(dá)PR;59例(79.7%)SPN、46例(90.2%)P-NET、5例(9.26%)PAC表達(dá)CD10;66例(89.2%)SPN、45例(88.2%)P-NET、2例(3.7%)PAC表達(dá)CD56;72例(97.3%)SPN、48例(94.1%)P-NET、3例(5.6%)PAC表達(dá)NSE;ACC及PB對以上各項(xiàng)標(biāo)記物均呈陰性。
結(jié)論:CD99的核旁點(diǎn)狀著色是診斷SPN最可靠的免疫
9、學(xué)標(biāo)記,β-catenin和E-cadhefin在SPN的診斷及鑒別診斷中也有重要意義。
第三部分胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤起源探討
背景和目的:胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤(SPN)的起源至今仍不清楚,由于其免疫表型的多樣性,對其來源的揣測也存在多種不同觀點(diǎn)。本部分旨在發(fā)現(xiàn)能闡述其起源的新線索。
方法:對74例SPN石蠟標(biāo)本進(jìn)行上皮和神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記的免疫組織化學(xué)檢測;對14例SPN新鮮標(biāo)本行透射電鏡觀察;用免疫電鏡法觀察上
10、皮和神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記抗體在5例SPN細(xì)胞內(nèi)的定位;同時以正常胰腺組織各種細(xì)胞成分為對照,尋找與其起源相關(guān)的超微結(jié)構(gòu)和免疫電鏡特征。
結(jié)果:74例SPN病例對除CK7、CK19以外的上皮及神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記均有不同程度表達(dá)。超微結(jié)構(gòu)示SPN含豐富細(xì)胞器,主要為大量線粒體,其次為溶酶體,14例SPN中8例可見環(huán)狀片層結(jié)構(gòu),11例見明顯的細(xì)胞連接,1例見可疑神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒,1例含類似酶原顆粒。免疫電鏡示5例SPN中分別有4例腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)
11、散在膠體金標(biāo)記的AE1/AE3和NSE,2例腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)散在膠體金標(biāo)記的SYN附著。
結(jié)論:SPN中保存了上皮細(xì)胞的某些超微結(jié)構(gòu)特征,是否存在酶原顆粒及神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒尚未明確;SPN可能起源于胰腺泡心細(xì)胞。
第四部分胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤中雌激素受體亞型的表達(dá)及功能探討
背景和目的:由于大多數(shù)胰腺實(shí)性假乳頭腫瘤(SPN)患者為年輕育齡女性,性激素在SPN腫瘤發(fā)生發(fā)展中可能起到重要作用,但大量研究均顯示SPIN
12、高表達(dá)PR卻缺乏ER表達(dá)。近年來有學(xué)者發(fā)現(xiàn)了雌激素受體亞型Erp蛋白在SPN中的表達(dá),然而關(guān)于Erα和Erβ這兩種亞型mRNA的定量研究尚是空白。本部分旨在通過對Erα,Erβ在SPN中的表達(dá)的定性定量研究,探討其與腫瘤發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。PR在腫瘤中的表達(dá)亦被納入研究。
方法:對74例SPN及腫瘤旁正常胰腺組織石蠟標(biāo)本進(jìn)行Erα、ERβ1、PR的免疫組織化學(xué)檢測;用qRT-PCR方法檢測Erα、ERβ1、ERβ2、PR在14例
13、手工顯微切割后的SPN新鮮標(biāo)本及腫瘤旁正常胰腺外分泌部的表達(dá)情況。
結(jié)果:74例SPN中5例(6.8%)SPN細(xì)胞核弱表達(dá)Erα,胰腺外分泌部均不表達(dá)Erα ERβ1在69例(93.2%)SPN及63例(85.1%)腫瘤旁正常胰腺外分泌系統(tǒng)細(xì)胞核有表達(dá),65例(75.7%)病例巾腫瘤染色強(qiáng)度高于正常胰腺組織,但表達(dá)相對強(qiáng)度在SPN侵襲性組與非侵襲性組中無顯著差異(P>0.05);71例(95.9%)SPN細(xì)胞核表達(dá)PR;正常胰
14、腺外分泌部均不表達(dá)PR。ERβ1、ERβ2 mRNA含量在SPN中比正常胰腺外分泌部高,但表達(dá)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),ERβ1/Erα、ERβ2/Erα比值在腫瘤組織中高于正常胰腺外分泌部,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);PR mRNA在腫瘤組織中的表達(dá)高于正常胰腺外分泌部,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P<0.01)。
結(jié)論:在正常胰腺外分泌部及SPN腫瘤細(xì)胞中,ERB為優(yōu)勢亞型,Erβ/Erα比值的上升在SPN發(fā)生
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