Toll樣受體4、9、10 mRNA在大鼠皮膚移植模型中免疫器官的表達(dá)變化情況.pdf

1、目的：樹突狀細(xì)胞（DCs)是體內(nèi)功能最強(qiáng)大的抗原遞呈細(xì)胞，可從非淋巴組織遷移至次級淋巴器官，刺激初始型T細(xì)胞的增殖活化，并向Th1細(xì)胞轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生急性排斥反應(yīng)。Toll樣受體（TLRs）在機(jī)體天然免疫中起重要作用，可特異性識別病原相關(guān)分子模式(PAMPs)，不但在激活固有免疫中發(fā)揮著重要作用，而且在誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫中也具有重要意義，是連接固有免疫及適應(yīng)性免疫的重要橋梁。TLRs可表達(dá)于DCs細(xì)胞表面，介導(dǎo)DCs成熟，通過一些列反應(yīng)使機(jī)

2、體產(chǎn)生急性排斥反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)TLR4、9參與急性排斥反應(yīng)，但研究結(jié)果均集中在免疫效應(yīng)器官（即移植物本身），未見對免疫系統(tǒng)其表達(dá)情況的研究。目前對TLR10的研究還比較少。故我們希望通過大鼠皮膚移植急性排斥模型，初步研究免疫系統(tǒng)中的中樞免疫器官胸腺、外周免疫器官脾臟和淋巴結(jié)中TLR4、9、10 mRNA的表達(dá)情況并初步探討胸腺、脾臟、淋巴結(jié)三者之間在急性排斥中的相互關(guān)系，為下一步對移植模型中DCs亞群的TLRs表達(dá)情況的研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

3、
　　方法：①制備大鼠皮膚移植模型：準(zhǔn)備好Wistar大鼠15只，SD大鼠15只用于制備異基因組（Wistar→SD）皮膚移植模型；SD大鼠30只用于制備同基因組（SD→SD）皮膚移植模型；SD大鼠15只用于制備假手術(shù)組（sham operation group，SHAM）皮膚移植模型；SD大鼠9只作為正常組（Normal）大鼠。②于皮膚移植手術(shù)后第1、4、7、10和14天取大鼠胸腺、脾臟、淋巴結(jié)用于檢測TLR4、9、10 mRN

4、A的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：⑴胸腺中TLR4、9、10的mRNA表達(dá)變化。對比各組分析，移植組的TLR4、9、10 mRNA表達(dá)均低于假手術(shù)組大鼠；從時間點(diǎn)分析，TLR4、9、10的表達(dá)量呈現(xiàn)逐漸升高，到術(shù)后第7天達(dá)到峰值，之后又逐漸下降的趨勢；異基因移植（W→S）組的表達(dá)水平較同基因移植（S→S）組高些；TLR4、9、10 mRNA的表達(dá)水平和趨勢基本相當(dāng)。⑵脾臟中TLR4、9、10 mRNA的表達(dá)變化情況。對比各組分析，移植組的

5、TLR4、9、10 mRNA表達(dá)水平高于假手術(shù)組大鼠；從時間點(diǎn)分析，TLR4、9、10的表達(dá)量一開始低于正常，后逐漸升高；異基因移植組的表達(dá)水平較同基因移植組稍高些；TLR4、9、10 mRNA的表達(dá)水平和趨勢基本相當(dāng)。⑶淋巴結(jié)中TLR4 mRNA的表達(dá)變化情況。對比各組分析，異基因組表達(dá)水平高于同基因組，而假手術(shù)組介于二者之間；從時間點(diǎn)分析，TLR4、9、10 mRNA表達(dá)水平均有升有降，表現(xiàn)趨勢不完全一致，總體來看異基因組呈現(xiàn)波動上

6、升，同基因組表現(xiàn)震蕩平穩(wěn)，而假手術(shù)組表現(xiàn)波動下降；TLR4、9、10 mRNA的表達(dá)水平和趨勢基本相當(dāng)。
　　結(jié)論：①通過對大鼠皮膚移植模型的中樞及外周免疫器官中TLR4、9、10mRNA的研究，我們推測：TLR4、9、10參與急性排斥反應(yīng)，作用為促進(jìn)移植排斥反應(yīng)，且三者之間可能存在協(xié)同效應(yīng)；免疫器官間存在復(fù)雜的調(diào)控體系，胸腺在急性排斥反應(yīng)中主要作用可能為免疫抑制，脾臟和淋巴結(jié)也參與免疫調(diào)節(jié)，并同其它免疫器官和免疫效應(yīng)器官共同作用