丹參注射液對宮內(nèi)感染致早產(chǎn)仔鼠腦室周圍白質(zhì)軟化癥中NGF及 GDNF表達(dá)的影響.pdf

1、　　目的：通過觀察丹參注射液對宮內(nèi)感染致早產(chǎn)仔鼠腦室周圍白質(zhì)軟化組織中神經(jīng)生長因子(NGF)和膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)水平的調(diào)節(jié)作用,探討活血化瘀藥物丹參注射液改善早產(chǎn)腦室周圍白質(zhì)軟化的作用機制,為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　方法：( 1 )動物模型制備：24 只脂多糖(LPS)組孕鼠孕第 16 天予LPS350μg/kg·d,6只生理鹽水組孕鼠予同劑量的生理鹽水,連續(xù) 2天腹腔注射。孕 22 天前出生的仔鼠為早產(chǎn)鼠

2、。仔鼠出生后隨機選取 LPS 組和對照組各 2 只孕鼠取子宮和胎盤行HE染色,判斷宮內(nèi)感染情況。LPS組和對照組仔鼠各10只斷頭取腦組織行HE染色,觀察腦白質(zhì)損傷情況。(2)分組：隨機選LPS組早產(chǎn)仔鼠40只,LPS組仔鼠隨機分為4組,每組10只,分別為：丹參注射液高劑量組(A)、丹參注射液低劑量組(B)、神經(jīng)節(jié)苷酯組(C)、模型組(D)；隨機選取生理鹽水組足月產(chǎn)仔鼠10只作為空白對照組(E)。(3)干預(yù)方法：生后第2周A組予丹參注射液

3、 9ml/㎏·d 腹腔注射,B 組予丹參注射液 4.5ml/㎏·d 腹腔注射,C組予單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉注射液 6ml/㎏·d腹腔注射,D組與E組予生理鹽水9ml/㎏·d腹腔注射,干預(yù)1周。(4)21日齡時對5組大鼠行神經(jīng)行為學(xué)檢測(懸吊試驗、斜坡試驗、Cylinder 試驗),免疫組化方法對腦組織 NGF、GDNF進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果：(1)30 只雌性大鼠,LPS 組 24 只孕鼠,6 只分娩前死亡,13 只提前分娩,

4、5只足月分娩,共娩出早產(chǎn)仔鼠79只,死產(chǎn)仔鼠46只,足月仔鼠49只。生理鹽水組孕鼠6只,均順利足月生產(chǎn),共娩出活產(chǎn)足月仔鼠 57只。與生理鹽水組仔鼠相比,LPS 組仔鼠出生后皮膚顏色紫紺、活動少、體重低。(2)LPS 組孕鼠子宮壁及胎盤病理 HE 染色可見血管充血、水腫,可見大量中性粒細(xì)胞浸潤。LPS 組仔鼠腦室周圍白質(zhì)出現(xiàn)染色淡、結(jié)構(gòu)疏松、神經(jīng)纖維排列紊亂、可見出血改變等病理變化。(3)神經(jīng)行為學(xué)檢測：①與對照組相比,模型組及各干預(yù)治

5、療組神經(jīng)行為學(xué)檢測均有顯著差異(P﹤0.01)；②與模型組相比,丹參注射液低劑量組、高劑量組及神經(jīng)節(jié)苷酯組神經(jīng)行為學(xué)檢測均有統(tǒng)計學(xué)意義；③與丹參注射液低劑量組相比,丹參注射液高劑量、神經(jīng)節(jié)苷酯組3組相互間無統(tǒng)計學(xué)差異(P﹥0.05),說明丹參注射液低劑量、高劑量和神經(jīng)節(jié)苷酯在改善仔鼠的神經(jīng)行為學(xué)方面效果相當(dāng)或者與樣本量較少有關(guān)。(4) NGF與GDNF的表達(dá)：模型組及丹參注射液低劑量組、高劑量組、神經(jīng)節(jié)苷酯組陽性表達(dá)增強,對照組表達(dá)較少

6、(P ﹤0.01)；丹參注射液低劑量組、高劑量組、神經(jīng)節(jié)苷酯組陽性表達(dá)均較模型組明顯增強(P﹤0.01)；丹參注射液低劑量組、高劑量組及神經(jīng)節(jié)苷酯組 3 組相比,相互間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P﹥0.05)。
　　結(jié)論：(1)宮內(nèi)感染可導(dǎo)致早產(chǎn)仔鼠神經(jīng)行為學(xué)改變、使腦組織中 NGF 和GDNF表達(dá)上調(diào)。(2)丹參注射液對宮內(nèi)感染致早產(chǎn)仔鼠腦組織中 NGF和GDNF表達(dá)有調(diào)節(jié)作用,其減輕腦損傷機制可能與上調(diào)腦組織中 NGF 及 GDNF