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1、鄭碩士淪文題目:作者姓名:學(xué)科門類:專業(yè)名稱:導(dǎo)帥姓名、耿稱:授予單位代碼10459學(xué)號或申請?zhí)枺?!!!!!密級:州火學(xué)位攔芻淪一艾宮內(nèi)感染和宮內(nèi)室息對早產(chǎn)鼠腦損傷的聯(lián)合作用董慧芳醫(yī)學(xué)兒科學(xué)程秀永教授朱長連教授二零零五年五月2005年碩士研究生畢業(yè)論文宮內(nèi)感染和宮內(nèi)窒息對早產(chǎn)鼠腦損傷的聯(lián)合作用(摘要部分)娠第一天,提出單獨喂養(yǎng)。2通過預(yù)實驗確定宮內(nèi)感染合并宮內(nèi)窒息早產(chǎn)鼠腦損傷模型制作方法為LPS05mg/kg十宮內(nèi)窒息15min。3宮
2、內(nèi)感染合并宮內(nèi)窒息動物模型的制作:妊娠18天的孕鼠腹腔注射LPS05mg/kg后4h,乙醚吸入麻醉,仰臥位固定于手術(shù)臺上,腹部剪毛后常規(guī)消毒,下腹部正中切口開腹,輕輕拉出子宮后置于溫紗墊上,無創(chuàng)血管夾鉗夾子宮動脈和胎盤分支血管15min。之后用溫生理鹽水濕潤的紗布覆蓋在子宮上,不時更換,以保持子宮的溫度和濕度。窒息時間滿足后,取下血管夾,將子宮送回腹腔,縫合腹部。切口消毒后用無菌紗布包扎。Ns假術(shù)組孕鼠腹腔注射1MNS后4h,僅手術(shù)分離
3、子宮動脈和胎盤分支血管,不結(jié)扎,15min后送回腹腔(方法同上)。NS窒息組動物腹腔注射ImlNS后4h,同上方法鉗夾子宮動脈和胎盤分支血管15min。4標(biāo)本制備:各組試驗條件滿足后,剖腹取出胎鼠,麻醉后經(jīng)左心室灌注生理鹽水5ml,然后灌注10%多聚甲醛直至軀體蒼白變硬,取出腦組織,置lO%多聚甲醛溶液中固定72h以上。經(jīng)脫水、透明、浸蠟后石蝤包埋。切片以海馬部位為標(biāo)志,片厚5啪。5切片處理:切片分別進行HE染色、TUNEL染色、6FA
4、P免疫組化、TNF—a免疫組化和tPA免疫組化(均為SABC法)。結(jié)果:1HE染色:LPS窒息組鼠腦細(xì)胞水腫程度、細(xì)胞層次紊亂程度較LPS組和窒息組為重,凋亡細(xì)胞數(shù)量較LPS組和窒息組多。并且,LPs窒息組有腦室背側(cè)角出血、腦室擴大以及腦室背側(cè)角壞死后囊性空洞現(xiàn)象,而窒息組無上述現(xiàn)象,LPS組僅有1例發(fā)生側(cè)腦室出血。2TUNEL和GFAP染色:兩者結(jié)果均為:陽性細(xì)胞數(shù)LPs窒息組:LPS組、窒息組NS假術(shù)組,LPS窒息組與LPS組、窒息
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