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1、目的:研究胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)在高糖條件下對(duì)大鼠胰島細(xì)胞功能的影響及對(duì)胰島細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制。 方法:按體外培養(yǎng)SD大鼠胰島的培養(yǎng)液不同,分為三組:對(duì)照組(葡萄糖5.6mmol/l)、高糖組(葡萄糖15.6mmol/l)、IGF-1組(葡萄糖15.6retool/l+IGF-110ng/ml)培養(yǎng)48小時(shí),檢測(cè):采用放免法和免疫組化法檢測(cè)胰島分泌功能;采用Hoechst33342免疫熒光細(xì)胞核染色、TUNEL法和電
2、鏡觀察胰島細(xì)胞凋亡水平;采用免疫組化法檢測(cè)抗凋亡因子。Bc1-2的表達(dá)率。 結(jié)果:與對(duì)照組相比,高糖組的胰島素分泌量、細(xì)胞內(nèi)胰島素表達(dá)率明顯減少(P<0.05);凋亡細(xì)胞明顯增多(P<0.05);抗凋亡因子Bc1-2表達(dá)率明顯減少(P<0.05);Hoechst33342熒光染色高糖組細(xì)胞核碎裂、核固縮多見(jiàn);電鏡觀察高糖組胰島B細(xì)胞核仁消失,核膜變形,分泌顆粒明顯較減少,在B細(xì)胞周?chē)懊?xì)血管間有淀粉樣物質(zhì)沉著。IGF-1組胰島
3、素分泌量、細(xì)胞內(nèi)胰島素表達(dá)率均明顯高于對(duì)照組及高糖組(P<0.05);胰島細(xì)胞凋亡率較高糖組明顯下降但仍高于對(duì)照組(P<0.05);抗凋亡因子Bc1-2表達(dá)率較高糖組增加但低于對(duì)照組(P<0.05);Hoechst33342熒光染色I(xiàn)GF-1組細(xì)胞核完整,核碎裂、核固縮少見(jiàn);電鏡觀察IGF-1組細(xì)胞核形態(tài)結(jié)構(gòu)正常及分泌顆粒數(shù)量相對(duì)增加。 結(jié)論: IGF-1可以直接作用于胰島細(xì)胞,具有促進(jìn)胰島素分泌的作用,并有抵抗細(xì)胞凋亡作用,這
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