Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤預(yù)后及治療中的作用研究.pdf

1、[背景目的]
　　 軟骨肉瘤是常見惡性骨腫瘤之一。發(fā)病率約占骨原發(fā)性惡性腫瘤的20％，居骨肉瘤之后，列第2位。軟骨肉瘤相對(duì)其他腫瘤而言以細(xì)胞外基質(zhì)多、分裂細(xì)胞比例小、血管相對(duì)少為組織特點(diǎn)，因此軟骨肉瘤對(duì)化療和放療都有一定的抵抗。因此，臨床上手術(shù)大塊切除依然是軟骨肉瘤最主要的治療方法。但是術(shù)后復(fù)發(fā)率有20％之多，而且復(fù)發(fā)病例的惡性程度會(huì)逐漸增高。目前，因分子靶向治療具有特異性高、損傷小、毒副作用小的特點(diǎn)，已成為繼手術(shù)、放療和化療之

2、后的新的治療手段。因此，尋找可用于治療軟骨肉瘤的靶點(diǎn)對(duì)于軟骨肉瘤的治療具有十分重要的意義。
　　 Aurora Kinase A參與中心體的成熟、分離;紡錘體的組裝、穩(wěn)定;染色體的濃集、中板聚合和穩(wěn)定等多種有絲分裂事件，其過表達(dá)會(huì)引起中心體的擴(kuò)增、多倍體的形成以及p53的缺失等。陸續(xù)有文獻(xiàn)報(bào)道多種惡性腫瘤中均發(fā)現(xiàn)有Aurora Kinase A的高表達(dá)。Aurora Kinase A已被證實(shí)為能引起惡性腫瘤發(fā)生的新的癌基因。

3、r>　　 Aurora Kinase B是一種染色體過客蛋白，在細(xì)胞內(nèi)與INCENP、BOREALIN、SURVIVIN等共同組成染色體過客蛋白復(fù)合物，在細(xì)胞有絲分裂中起著調(diào)節(jié)染色體精確分離、組蛋白修飾和胞質(zhì)分裂的作用，也被證實(shí)與腫瘤的發(fā)展有密切關(guān)系。并且，目前已有多項(xiàng)研究報(bào)道Aurora Kinase活性抑制劑有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，并有多種抑制劑已經(jīng)進(jìn)入臨床前期試驗(yàn)。
　　 但是國(guó)內(nèi)外關(guān)于Aurora Kinase A、

4、B與軟骨肉瘤關(guān)系的研究尚未見報(bào)道。為了探索Aurora Kinase A、B在人軟骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用，為以AuroraKinase A、B為靶點(diǎn)進(jìn)行靶向治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，本論文從以下兩個(gè)方面進(jìn)行了研究:
　　 1.Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤組織中的表達(dá)及臨床意義;
　　 2.AuroraKinase A基因沉默對(duì)軟骨肉瘤細(xì)胞株sw1353細(xì)胞增殖能力的影響。
　　 [實(shí)驗(yàn)方法]
　　

5、 1.收集山東大學(xué)齊魯醫(yī)院2005年1月1日至2011年6月30日期間的手術(shù)切除后經(jīng)病理診斷為軟骨肉瘤標(biāo)本72例，同時(shí)收集整理所選病例的臨床資料，并對(duì)入選病例進(jìn)行電話隨訪。另外選取42例軟骨瘤作為對(duì)照。采用免疫組織化學(xué)SP法，檢測(cè)軟骨肉瘤和軟骨瘤組織中Aurora Kinase A、B的表達(dá)，評(píng)價(jià)Aurora Kinase A、B的表達(dá)與軟骨肉瘤臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。
　　 2.檢測(cè)Aurora Kinase A在軟骨肉瘤

6、SW1353細(xì)胞中的表達(dá)，利用RNA干擾技術(shù)沉默SW1353細(xì)胞中Aurora Kinase A的表達(dá)，采用MTT法檢測(cè)Aurora KinaseA基因沉默對(duì)SW1353細(xì)胞增殖能力的影響。
　　 [實(shí)驗(yàn)結(jié)果]
　　 1.Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤組織中的表達(dá)明顯高于在軟骨瘤組織中的表達(dá)（P＜0.01）;Aurora Kinase A、B在普通型中高級(jí)別軟骨肉瘤中的表達(dá)高于低級(jí)別組的表達(dá)(P＜0.01)

7、; Aurora Kinase A、B在軟骨肉瘤復(fù)發(fā)組和轉(zhuǎn)移組中的表達(dá)均高于非復(fù)發(fā)組非轉(zhuǎn)移組，其表達(dá)亦有顯著性差異(P＜0.05);
　　 2.生存分析結(jié)果顯示Aurora Kinase A陽(yáng)性表達(dá)組生存率低于Aurora Kinase A陰性組，具有顯著性差異(P＜0.05)。多因素Cox風(fēng)險(xiǎn)回歸分析顯示AuroraKinase A高表達(dá)為影響預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因子(HR=11.263，95％CI:2.317-54.748，P=0