Hippo信號通路作用分子TAZ在人骨肉瘤及骨肉瘤干細(xì)胞中的表達(dá).pdf

1、目的：檢測在人骨肉瘤組織、骨肉瘤MG63細(xì)胞及骨肉瘤干細(xì)胞中Hippo信號通路作用分子TAZ的表達(dá)情況，比較骨肉瘤細(xì)胞和骨肉瘤干細(xì)胞中TAZ的表達(dá)差異，并探討TAZ在人骨肉瘤中可能的臨床意義。
　　方法：從2010年1月至2012年1月，在我院骨腫瘤科治療的骨肉瘤患者中，選取原發(fā)四肢骨肉瘤組織標(biāo)本12例，復(fù)發(fā)的四肢骨肉瘤標(biāo)本6例，另外，選取6例骨纖維結(jié)構(gòu)不良組織作為陰性對照，并貼壁培養(yǎng)骨肉瘤MG63細(xì)胞，采用免疫組化方法檢測骨肉瘤

2、組織和骨肉瘤MG63細(xì)胞中TAZ的表達(dá)情況；用無血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)骨肉瘤 MG63細(xì)胞，觀察骨肉瘤 MG63細(xì)胞成球情況并計算成球比，然后，分離并收集骨肉瘤細(xì)胞球，通過實時定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測骨肉瘤 MG63細(xì)胞及骨肉瘤細(xì)胞球中胚胎干細(xì)胞標(biāo)志基因Nanog、Oct4和Hippo信號作用分子TAZ的表達(dá)，通過Western印記法檢測MG63細(xì)胞和細(xì)胞球中TAZ蛋白的表達(dá)情況，并比較其表達(dá)差異。
　　結(jié)果：在

3、12例人骨肉瘤原發(fā)組織標(biāo)本中，3例骨肉瘤組織TAZ表達(dá)陽性，而6例人骨肉瘤復(fù)發(fā)組織中TAZ表達(dá)全部陽性，在骨肉瘤細(xì)胞MG63中TAZ蛋白表達(dá)也呈陽性，而在骨纖維結(jié)果不良中TAZ全部表達(dá)陰性。與骨肉瘤MG63細(xì)胞相比，RT-PCR顯示培養(yǎng)的骨肉瘤細(xì)胞球中干細(xì)胞標(biāo)志基因Nanog，Oct4和Hippo信號分子TAZ明顯高表達(dá)。Western blot提示細(xì)胞球中TAZ蛋白表達(dá)明顯高于骨肉瘤MG63細(xì)胞。兩組之間TAZ的表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（