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文檔簡介
1、近年來,有關(guān)炎性反應(yīng)受到神經(jīng)回路調(diào)控的發(fā)現(xiàn)將免疫學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)聯(lián)系到了一起。這一發(fā)現(xiàn)的意義在于免疫系統(tǒng)將不再被認(rèn)作是一個完全自主的獨(dú)立系統(tǒng),而這種炎癥反應(yīng)的神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控通路被稱為膽堿抗炎癥通路。a7 nAChR,是乙酰膽堿受體家族的一個成員,它在神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛分布。該家族成員在神經(jīng)元細(xì)胞上形成同五聚體或者異五聚體受體,并作為配體控制的離子通道介導(dǎo)突觸中信號的快速傳遞。除了神經(jīng)系統(tǒng),a7 nAChR在免疫細(xì)胞中廣泛表達(dá),現(xiàn)已在單核、巨噬、
2、T、B淋巴細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞中證實了其存在。使用a7 nAChR的非選擇性激活劑(如nicotine)或者選擇性激活劑(如choline或GTS-21)能夠在單核和巨噬細(xì)胞中活化多個細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)級聯(lián)反應(yīng),下調(diào)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活性以及TLR4的表達(dá),并且抑制炎性因子的轉(zhuǎn)錄。
本實驗應(yīng)用膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(collagen induced arthritis,CIA)模型小鼠作為實驗?zāi)P?,檢測了煙堿干預(yù)對CIA小鼠的免疫調(diào)節(jié)
3、作用。結(jié)果顯示,煙堿干預(yù)能夠有效地減緩模型小鼠關(guān)節(jié)炎病程,減輕炎癥細(xì)胞浸潤、關(guān)節(jié)軟骨侵蝕等關(guān)節(jié)炎癥狀;而且流式結(jié)果顯示煙堿干預(yù)能夠降低模型小鼠脾臟中CD4+IL-17A+細(xì)胞比例(12.53%vs.7.63%);減弱炎癥相關(guān)細(xì)胞因子IL-17A、IL-21、IL-6 mRNA的表達(dá)。并且煙堿干預(yù)能夠降低模型小鼠血漿中炎癥細(xì)胞因子TNF-a含量。
同時,為了進(jìn)一步了解乙酰膽堿受體在CIA模型小鼠免疫系統(tǒng)中的作用機(jī)制,本研究檢
4、測了體外培養(yǎng)Th17細(xì)胞的乙酰膽堿受體(a7 nAChR)表達(dá),結(jié)果顯示在所有檢測細(xì)胞中,乙酰膽堿受體(a7 nAChR)陽性Th17細(xì)胞為8.49%,占IL-17A+細(xì)胞總數(shù)的25.64%。隨后,我們采用了抗體四聚體聯(lián)合磁珠分選方法,對Th17條件培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行了分選純化,純化后IL-17A+細(xì)胞達(dá)到58.49%。采用煙堿對純化后Th17培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行處理,流式檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)相比對照組,加入10-6M煙堿的培養(yǎng)細(xì)胞其細(xì)胞內(nèi)IL-17A熒光強(qiáng)
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