關(guān)節(jié)炎小鼠模型中髓系抑制性細胞對Th17細胞分化的調(diào)節(jié)作用及機制研究.pdf

1、髓系來源的免疫抑制性細胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs),是一群不成熟的髓系細胞,具有顯著抑制T細胞增殖的功能。大量研究已證實MDSCs在腫瘤腫的發(fā)生和發(fā)展中對免疫系統(tǒng)具有重要的調(diào)節(jié)作用,然而其在自身免疫病,特別是在類風濕關(guān)節(jié)炎中的研究才剛剛開始。在本研究中,我們將利用類風濕關(guān)節(jié)炎的動物模型,膠原誘導的關(guān)節(jié)炎(Collegan induced arthritis,CIA)小鼠作為研究對象,

2、探討MDSCs與Th17細胞分化之間的關(guān)系。我們首先觀察到MDSCs在小鼠中的主要標志是Gr-1和CD11b,同時觀察到小鼠體內(nèi)的MDSCs根據(jù)Gr-1的兩個不同抗原表位Ly6G和Ly6C表達水平的差異,分為兩個不同的亞群:單核樣MDSCs亞群和粒細胞樣MDSCs亞群(CD11b+Ly6ChiLy6G-亞群和CD11b+Ly6CloLy6G-亞群,M-MDSCs和G-MDSCs)。兩個亞群的數(shù)量和頻率在CIA發(fā)病小鼠的脾臟中出現(xiàn)顯著的升

3、高。進一步的研究發(fā)現(xiàn),Gr-1特異性抗體同時清除M-MDSCs和G-MDSCs亞群能夠延遲小鼠關(guān)節(jié)炎發(fā)病,降低關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率,改善關(guān)節(jié)局部紅腫程度,減輕滑膜增生和關(guān)節(jié)面破壞程度。這些數(shù)據(jù)表明,MDSCs對小鼠關(guān)節(jié)炎的發(fā)生具有重要作用。然而,借助特異性抗體Ly6G清除G-MDSCs亞群不能夠顯著改善小鼠關(guān)節(jié)炎發(fā)病的嚴重程度。在抗體清除MDSCs亞群的實驗中,我們發(fā)現(xiàn)清除M-MDSCs亞群能夠?qū)е滦∈笃⑴KTh17細胞頻率及數(shù)量下降。提示M-

4、MDSCs亞群可能是通過調(diào)節(jié)Th17細胞進而影響關(guān)節(jié)炎的發(fā)病。為了進一步確證MDSCs的兩個亞群M-MDSCs和G-MDSCs亞群對Th17細胞分化的作用,我們將MDSCs的兩個亞群分別與CD4+CD62L+naive T細胞進行體外共培養(yǎng),檢測Th17細胞分化的變化,IL-17分泌的變化和IL-17mRNA表達的變化。體外實驗的數(shù)據(jù)顯示M-MDSCs亞群與CD4+CD62L+naive T細胞共培養(yǎng)能夠提高Th17細胞頻率和數(shù)量,促進

5、IL-17的分泌并上調(diào)IL-17mRNA的表達水平。然而在G-MDSCs亞群與CD4+CD62L+naive T細胞共培養(yǎng)體系中,并未發(fā)現(xiàn)Th17細胞分化增高,IL-17分泌的增加和IL-17mRNA表達水平的上調(diào)。這些結(jié)果提示M-MDSCs亞群能夠促進Th17細胞的分化,而G-MDSCs亞群促進Th17細胞分化的作用非常微弱。
　　為了進一步研究M-MDSCs亞群對Th17細胞分化的免疫調(diào)節(jié)作用及免疫調(diào)節(jié)機制,我們采用了膜蛋白中