SB203580對糖皮質(zhì)激素敏感性的影響及作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　 建立煙霧暴露的哮喘大鼠模型及尼古丁誘導(dǎo)人肺腺癌A549細(xì)胞糖皮質(zhì)激素抵抗的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，觀察p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制劑SB203580對煙霧暴露的哮喘大鼠的影響，并分別從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)、體外實(shí)驗(yàn)兩個(gè)方面探討SB203580影響糖皮質(zhì)激素敏感性的機(jī)制。
　　 方法：
　　 Wistar大鼠隨機(jī)分為4組，即正常對照組、哮喘組、煙霧暴露的哮喘組及SB203580干預(yù)組。動(dòng)物肺功能儀測定大鼠呼

2、氣阻力、吸氣阻力及肺順應(yīng)性，觀察肺組織病理學(xué)改變，通過ELISA檢測大鼠肺組織勻漿中IL-4、IL-5和IL-8的水平。經(jīng)RT-PCR檢測大鼠肺組織糖皮質(zhì)激素受體(GR)、HSP90和p38MAPK mRNA的表達(dá)，經(jīng)Westem blot檢測大鼠肺組織GR、HSP90和p38MAPK蛋白的表達(dá)。培養(yǎng)A549細(xì)胞，將其隨機(jī)分為四組：A組：空白對照組，B組：1umol/L的地塞米松，C組：1umol/L的地塞米松+1umol/L的尼古丁，

3、D組：1umol/L的地塞米松+1umol/L的尼古丁+1umol/L的SB203580，采用免疫熒光染色技術(shù)分析GR亞細(xì)胞定位。
　　 結(jié)果：
　　 與煙霧暴露的哮喘組相比，SB203580干預(yù)組大鼠的氣道阻力顯著下降，肺順應(yīng)性顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；氣道炎癥明顯減輕；肺組織中IL-4、IL-5和IL-8的含量顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；肺組織GRmRNA的表達(dá)無明顯變化，HSP90

4、和p38MAPK mRNA的表達(dá)顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；肺組織GR、HSP90和p38MAPK蛋白表達(dá)呈現(xiàn)與mRNA表達(dá)相一致的結(jié)果。C組A549細(xì)胞GR的核漿比為0.08±0.05，D組A549細(xì)胞GR的核漿比為0.59±0.25，兩組之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 p38 MAPK抑制劑SB203580可以改善煙霧暴露的哮喘大鼠的氣道炎癥，減輕其支氣管收縮反應(yīng)。其通過