以?？颂婺釣榇淼陌邢蛩幝?lián)合化療藥物對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株的作用研究.pdf

1、目的:本研究以人肺腺癌EGFR野生型GLC-82細(xì)胞和EGFR突變型PC-9細(xì)胞為研究對(duì)象，選擇EGFR-TKI代表藥物鹽酸埃克替尼與化療藥（多西他賽/培美曲塞）聯(lián)合，通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，分別觀察?？颂婺崤c多西他賽、培關(guān)曲塞單藥及其不同聯(lián)合方式對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用，旨在為臨床治療中靶向藥物與化療藥物的合理聯(lián)合提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　(1)運(yùn)用RTCA xCELLigence系統(tǒng)分別檢測(cè)鹽酸埃克替尼、多西他賽、培關(guān)

2、曲塞單藥對(duì)GLC-82和PC-9細(xì)胞的增值抑制作用，并檢測(cè)藥物在細(xì)胞內(nèi)的作用穩(wěn)定時(shí)間，運(yùn)用RTCA xCELLigence系統(tǒng)擬合每種藥物在細(xì)胞內(nèi)作用穩(wěn)定時(shí)間內(nèi)的IC50。
　　(2)采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)?？颂婺崤c多西他賽/培美曲塞不同方式聯(lián)合用藥后各組細(xì)胞周期的分布。
　　(3)運(yùn)用RTCA xCELLigence系統(tǒng)檢測(cè)?？颂婺崤c多西他賽或培美曲塞聯(lián)合用藥時(shí)GLC-82細(xì)胞的細(xì)胞指數(shù)CI，并計(jì)算其倍增時(shí)間。(4)采用流式細(xì)

3、胞術(shù)檢測(cè)聯(lián)合用藥對(duì)PC-9細(xì)胞凋亡率的影響。
　　結(jié)果:
　　(1)多西他賽、培美曲塞作用于細(xì)胞36h后達(dá)到平衡期，而?？颂婺嶙饔糜诩?xì)胞60h后達(dá)到平衡期。
　　(2)多西他賽作用于GLC-82細(xì)胞系36h的IC50為25mg·mL-1，培關(guān)曲塞作用于GLC-82細(xì)胞系36h的IC50為560μM，埃克替尼作用于GLC-82細(xì)胞系60h的IC50為10μM;多西他賽對(duì)PC-9細(xì)胞作用36h后的IC50為21.5 mg·

4、mL-1，培關(guān)曲塞對(duì)PC-9細(xì)胞作用36h后的IC50為30μM，埃克替尼對(duì)PC-9細(xì)胞作用60h后的IC50值為5.3μM。
　　(3)流式細(xì)胞儀進(jìn)行周期檢測(cè)顯示單藥?？颂婺嶙饔糜诩?xì)胞后，G0/G1期細(xì)胞比例較高，單藥多西他賽作用于細(xì)胞后，G2/M期細(xì)胞比例較高，而單藥培美曲塞可將細(xì)胞阻滯于S期;埃克替尼先于或同時(shí)與化療藥（多西他賽或培美曲塞）聯(lián)用組G0/G1期細(xì)胞較多。
　　(4)先用多西他賽或培美曲塞后用?？颂婺岱桨概c

5、其他用藥方案相比，細(xì)胞倍增時(shí)間顯著增加(DTX-ICO組倍增時(shí)間為:-829.1±46.9h; PEM-ICO組倍增時(shí)間為:-342±3.4h)，與其他序貫聯(lián)合方式相比，細(xì)胞增殖抑制效果更好，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(5) AnnexinⅤ-FITC凋亡實(shí)驗(yàn)觀察到先用多西他賽組細(xì)胞凋亡率為（23±0.2）％，高于先用?？颂婺峤M（10.2±0.1）％和兩藥同時(shí)用藥組（15.8±0.4）％;先用培美曲塞組細(xì)胞凋亡率為(36.3±0.0