2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究發(fā)現(xiàn)BMP2/7異源二聚體蛋白成骨效率高于BMP同源二聚體蛋白,并克服了BMP同源二聚體的缺點,在骨修復(fù)再生方面具有廣泛應(yīng)用前景。
   本實驗希望通過體內(nèi)研究及體外研究,對BMP2/7異源二聚體成骨、破骨作用特點和成骨信號通路進(jìn)行初步探討。
   第一部分:RhBMP2/7異源二聚體誘導(dǎo)種植體周圍骨缺損修復(fù)體內(nèi)試驗
   方法:18只小型豬,建立種植體周圍骨缺損模型,并使用相同低濃度(30ng/mm3)rh

2、BMP2、rhBMP7同源二聚體及rhBMP2/7異源二聚體促進(jìn)骨修復(fù),用組織學(xué)及骨形態(tài)計量學(xué)方法檢測術(shù)后2,3,6周缺損區(qū)新骨形成情況,免疫組化方法分別在術(shù)后2,3,6周檢測新骨中骨鈣素、ALP、Ⅰ型膠原表達(dá)。
   結(jié)果:術(shù)后2,3,6周rhBMP2/7組骨缺損區(qū)新骨形成百分率顯著高于對照組、rhBMP2及rhBMP7組(P<0.05)。術(shù)后2,3,6周,rhBMP2/7組Ⅰ型膠原、ALP及骨鈣素表達(dá)均強(qiáng)于rhBMP2、rh

3、BMP7同源二聚體組及對照組。
   結(jié)論:本研究首次通過體外實驗證實,與rhBMP2、rhBMP7同源二聚體相比,rhBMP2/7異源二聚體能夠以較低濃度(30ng/mm3)應(yīng)用即可有效誘導(dǎo)骨再生。
   第二部分:RhBMP2/7異源二聚體誘導(dǎo)種植體周圍骨缺損破骨發(fā)生體內(nèi)試驗
   方法:小型豬種植體周骨缺損模型與第一部分相同,在2,3,6周時行TRAP特異性染色檢測新骨中破骨細(xì)胞的表達(dá)及數(shù)量;采用免疫組化方

4、法在2,3,6周時檢測新骨中OPG、RANKL表達(dá)。
   結(jié)果:術(shù)后2,3周時,rhBMP2/7組的骨缺損區(qū)破骨細(xì)胞計數(shù)均低于對照組、rhBMP2和rhBMP7組(P<0.05);rhBMP2/7組的OPG表達(dá)較rhBMP2組及rhBMP7組高(P<0.05),rhBMP2/7組的RANKL表達(dá)較rhBMP2組及rhBMP7組低(P<0.05);術(shù)后6周時各組破骨細(xì)胞計數(shù)及OPG,RANKL表達(dá)無顯著差異。
   結(jié)論

5、:rhBMP2/7在低濃度有效促進(jìn)成骨的同時,對破骨發(fā)生的激活弱于rhBMP2及rhBMP7;rhBMP2/7能影響OPG/RANKL/RANK調(diào)節(jié)系統(tǒng),促使骨重建活躍期OPG表達(dá)增加,而RANKL表達(dá)則增加較少,進(jìn)而調(diào)節(jié)骨重建。
   第三部分:RhBMP2/7異源二聚體誘導(dǎo)成骨發(fā)生細(xì)胞通路初步探討
   方法:體內(nèi)實驗部分,小型豬種植體周骨缺損模型與第一部分相同,采用免疫組化方法分別在2、3、6周時檢測smad1、s

6、mad4、smad7、runx2的表達(dá),對BMP2/7異源二聚體在BMP-Smads通路各節(jié)點相關(guān)因子表達(dá)進(jìn)行研究。體外實驗部分使用相同濃度梯度(0,20,50,150,200ng/ml)rhBMP2/7異源二聚體、rhBMP2和rhBMP7同源二聚體在體外誘導(dǎo)成骨前體細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞,采用RT-PCR方法對BMP-Smads通路中各節(jié)點蛋白基因表達(dá)進(jìn)行研究。
   結(jié)果:體內(nèi)實驗部分,第3、6周,各實驗組之間Smad1

7、、Smad7免疫組化表達(dá)未見顯著性差異(P>0.05);第2、3周,Smad4在各組中中表達(dá)無顯著差別(P<0.05);第2、3周,Runx2在BMP2/7組較BMP2、BMP7組表達(dá)強(qiáng)。
   體外實驗部分,1天時,rhBMP2/7上調(diào)Smad1基因的水平在0-150ng/ml時均低于rhBMP2但高于rhBMP7;上調(diào)Smad4基因的水平在0-200ng/ml時均低于rhBMP2;上調(diào)Smad7及runx2基因的水平低于rh

8、BMP2,但高于rhBMP7。4天時,rhBMP2/7上調(diào)Smad1基因的水平在25-100ng/ml時均低于rhBMP2但高于rhBMP7;上調(diào)Smad4基因的水平在0-45ng/ml時均高于rhBMP2;上調(diào)Smad7和runx2基因的水平高于rhBMP2和rhBMP7(P<0.05)。
   結(jié)論:動物實驗和細(xì)胞實驗中,與rhBMP2和rhBMP7相比,rhBMP2/7對BMP-Smads通路各節(jié)點因子的表達(dá)促進(jìn)作用不明顯

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