吡喹酮長(zhǎng)循環(huán)納米粒的制備及其在家兔體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究.pdf

1、一、目的
　　 吡喹酮(PZQ)是抗血吸蟲病的首選藥物,也是目前唯一對(duì)感染人體的五種血吸蟲病均有效的藥物,但該化合物首過效應(yīng)強(qiáng),代謝產(chǎn)物無活性,生物利用度低,口服劑量大,注射給藥刺激性強(qiáng),嚴(yán)重限制了其藥效的發(fā)揮及推廣應(yīng)用。因此,本課題擬構(gòu)建可延長(zhǎng)藥物體內(nèi)循環(huán)時(shí)間、提高其血藥濃度的PZQ長(zhǎng)循環(huán)納米粒,建立其質(zhì)量評(píng)價(jià)方法,在此基礎(chǔ)上研究其家兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)行為,為開發(fā)提高PZQ療效的新制劑技術(shù)奠定基礎(chǔ)。
　　 二、方法與結(jié)果

2、r>　　 采用乳化-超聲分散法制備PZQ納米粒,以外觀、粒徑、包封率、穩(wěn)定性為評(píng)價(jià)指標(biāo),以單因素考察結(jié)合正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化處方與工藝,得最佳處方為:主藥(60 mg)、山崳酸甘油酯(0.3 g)、單硬脂酸甘油酯(0.3 g)、乙酸丁酯(0.3 g)、豆磷脂(1.0 g)、泊洛沙姆188(0.8 g)、硬脂酸鈉(40 mg)、H2O(20 mL);最佳工藝條件為:水相(豆磷脂、泊洛沙姆188、硬脂酸鈉、H2O)與油相(PZQ、山崳酸甘油酯

3、、單硬脂酸甘油酯、乙酸丁酯)分別水浴溶解(70℃),水相注入油相后高速剪切(8000 rpm,10 min),探頭超聲(10 min),磁力攪拌冷卻至室溫,即得PZQ納米粒。在PZQ納米粒處方中加入長(zhǎng)循環(huán)修飾材料DSPE-PEG2000制備PZQ長(zhǎng)循環(huán)納米粒(LCN),以DSPE-PEG2000用量(0％、2.5％、5.0％、10.0％)為考察因素,以粒徑、表面電荷、表面固有水化層厚度、包封率、釋放度、細(xì)胞吞噬率為評(píng)價(jià)指標(biāo),優(yōu)化處方。<

4、br>　　 DSPE-PEG2000用量為0％、2.5％、5.0％、10.0％的LCN外觀均為略帶乳光的澄清透明液體;動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)得LCN粒徑分別為:95.57±1.27 nm、90.13±2.11 nm、94.91±3.19 nm、77.79±1.01 nm,隨DSPE-PEG2000用量的增加而減小;流動(dòng)電位法測(cè)得LCN的Zeta電位分別為:-50.3±1.1 mV、-49.4±1.2 mV、-47.9±1.2 mV、-40.3

5、±1.4mV,隨DSPE-PEG2000用量的增加絕對(duì)值降低,DSPE-PEG2000可以降低納米粒表面電荷;根據(jù)Gouy-Chapmann擴(kuò)散雙電層模型算得LCN表面固有水化層厚度分別為:1.56 nm±0.32 nm、2.41±0.24 nm、4.97±0.16 nm、7.03±0.39 nm,隨DSPE-PEG2000用量的增加而增大;以葡聚糖凝膠微柱離心法和HPLC法測(cè)得LCN的包封率分別為:72.7％±2.7％、70.1％±3

6、.1％、67.3％±0.9％、68.2％±3.5％,與DSPE-PEG2000用量的變化關(guān)系不大;動(dòng)態(tài)透析法和HPLC法測(cè)得LCN的24 h釋放度分別為:77.7％±3.5％、82.1％±3.7％、83.1％±2.8％、87.4％±4.2％,隨DSPE-PEG2000用量的增加而加快,釋放曲線經(jīng)Ritger-Peppas模型擬合,r值均大于0.9,n值均接近0.5,表明納米粒的釋藥以擴(kuò)散機(jī)制為主;通過體外巨噬細(xì)胞吞噬模型和HPLC法測(cè)得

7、LCN的細(xì)胞吞噬率分別為10.21％±2.85％、5.32％±1.93％、3.75％±1.31％、1.62％±0.41％,隨DSPE-PEG2000用量的增加而降低。這表明,PZQ-LCN中DSPE-PEG2000用量在0～10％的范圍內(nèi)增加時(shí),粒徑減小、Zeta電位降低、表面固有水化層厚度增大、細(xì)胞吞噬率降低,故選10％的DSPE-PEG2000用量為最佳PZQ-LCN最佳處方。
　　 家兔體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究,比較了PZQ注射液、

8、PZQ-SLN和PZQ-LCN體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的差異。家兔耳緣靜脈注射(10 mg·kg-1)PZQ注射液、PZQ-SLN和PZQ-LCN后,心臟取血,HPLC法測(cè)定血藥濃度,藥動(dòng)學(xué)參數(shù):t1/2分別為1.27±1.56 h、1.13±0.66 h和23.82±8.94,CL分別為:5.29±0.78 L·h-1.kg-1、2.38±1.00 L·h-1·kg-1和1.16±0.16 L·h-1·kg-1,表明與SLN相比LCN可延長(zhǎng)PZ

9、Q半衰期,降低藥物清除率;AUC0-t分別為1.48±0.27 mg·h·mL-1、3.52±1.79mg·h·mL-1和4.93±1.27 mg·h·mL-1,AUC0-∞分別為1.93±0.276mg·h·mL-1、5.07±2.77 mg·h·mL-1和8.79±1.21 mg·h·mL-1;MRT分別為:0.44±0.30 h、0.41±0.10 h和16.12±1.38 h,有效血液濃度(0.25μg·mL-1)持續(xù)時(shí)間分別為

10、0.75 h、1 h、12 h,與SLN相比,LCN顯著延長(zhǎng)了PZQ的體內(nèi)滯留時(shí)間,說明DSPE-PEG2000對(duì)納米粒的表面修飾可延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)有效血藥濃度的持續(xù)時(shí)間。
　　 三、結(jié)論
　　 本研究通過正交設(shè)計(jì)篩選優(yōu)化了SLN處方工藝,制備了粒徑小、包封率高、穩(wěn)定性強(qiáng)的PZQ-SLN。在此基礎(chǔ)上,系統(tǒng)考察了DSPE-PEG2000用量對(duì)PZQ-LCN粒徑、表面電荷、包封率、表面固有水化層厚度、釋放度、細(xì)胞吞噬率等理化性