重組乙肝病毒介導的干擾素α的轉基因表達.pdf

1、目的:觀察攜帶人干擾素α(IFN-α)基因的X基因缺陷的HBV DNA真核表達質粒在真核細胞中的復制表達效果.方法:將構建成功的目的質粒(攜帶TNF-α基因的X基因缺陷的HBV DNA真核表達載體pcDNA3-KN-F1F2-IFN-α)以及作為對照的三種質粒(克隆雙拷貝全長HBV基因組的真核表達質粒pcDNA3-ES-HBV2、X基因缺失的真核表達質粒pcDNA3-KN-F1F2和空載體pcDNA3),用陽離子脂質體轉染的方法,分別轉

2、染肝癌細胞HepG2,用熒光定量PCR法、ELISA法檢測HBV的復制表達水平;ELISA法、RT-PCR法檢測IFN-α表達水平.結果:1.建立目的重組病毒KN-F1F2-IFN-α的持續(xù)復制表達系統(tǒng)HepG2/KN-F1F2-IFN-α;2.X基因缺失的乙肝病毒(KN-F1F2)較之全長基因組的乙肝病毒(ES-HBV2)復制表達水平降低,而且的重組病毒KN-F1F2-IFN-α的復制表達水平較之ES-HBV2以及KN-F1F2均降低