腹瀉型腸易激綜合征患者血清中食物特異性IgG抗體及大腸粘膜樹(shù)突狀細(xì)胞的研究.pdf

1、[背景與目的]腸易激綜合征(irritablebowelsyndrome，IBS)是常見(jiàn)的功能性腸病。一些食物可誘發(fā)IBS特別是腹瀉型IBS(IBD-D)的癥狀，但機(jī)理尚不清楚。食物不耐受指特定的食物或食物成分對(duì)人體產(chǎn)生的不良作用，包括過(guò)敏反應(yīng)、酶缺乏的不良反應(yīng)、藥理副作用以及一些其他未確定的作用。人體的免疫系統(tǒng)對(duì)進(jìn)入體內(nèi)的某種或多種食物產(chǎn)生特異性免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)G抗體，IgG抗體與食物抗原形成免疫復(fù)合物

2、，造成機(jī)體損害。有研究提示，通過(guò)對(duì)血清食物特異性IgG抗體的檢測(cè)，可以反映IBS患者的食物不耐受的種類。但相關(guān)研究較少，且結(jié)果不盡一致。我們研究IBS-D患者血清中食物特異性IgG抗體，旨在探討其與IBS-D的可能關(guān)系?？贵w的產(chǎn)生與抗原刺激和遞呈等密切相關(guān)，樹(shù)突狀細(xì)胞(dendriticcells，DC)是腸粘膜重要的抗原遞呈細(xì)胞，激活體內(nèi)初始型免疫反應(yīng)，既可以對(duì)腸道有害抗原產(chǎn)生免疫激活，又可以對(duì)無(wú)害抗原產(chǎn)生免疫耐受，是啟動(dòng)、調(diào)控并維持

3、腸粘膜免疫應(yīng)答的重要環(huán)節(jié)。IBS患者腸道DC是否異常未見(jiàn)相關(guān)研究報(bào)道。我們對(duì)IBS-D患者大腸粘膜DC細(xì)胞進(jìn)行研究，旨在了解其是否存在異常，以及可能在IBS-D的作用，為IBS-D發(fā)病機(jī)制的研究提供新的線索。 [材料與方法] 1、選取IBS-D患者72例(男45例，女27例，年齡38.8±12.7歲，符合FGIDs羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn))和健康對(duì)照組135例(男80例，女55例，年齡45.6±8.4歲)?？崭钩殪o脈血2ml，用酶

4、聯(lián)免疫吸附法(ELISA)對(duì)血清進(jìn)行14種常見(jiàn)食物特異性IgG抗體進(jìn)行檢測(cè)，包括牛肉、雞肉、鱈魚(yú)、玉米、螃蟹、雞蛋、蘑菇、牛奶、豬肉、大米、蝦、大豆、西紅柿、小麥。分別計(jì)算IBS-D組及健康對(duì)照組血清中各種食物特異性IgG抗體的陽(yáng)性率，比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；選擇兩組間血清食物特異性IgG抗體陽(yáng)性率有明顯差異的食物作為研究對(duì)象，對(duì)其IgG抗體半定量滴度與IBS-D患者的癥狀嚴(yán)重程度進(jìn)行相關(guān)性分析；計(jì)算IBS-D組與健康對(duì)照組血清中對(duì)一種以上食物

5、的抗體陽(yáng)性率即總陽(yáng)性率，比較兩組間的差異；分別計(jì)算兩組血清中具有一種、2種及3種以上食物的IgG抗體陽(yáng)性率，比較兩組之間的差異。 2、選取IBS-D患者20例(男16例，女4例，平均年齡37.8±4.7歲，符合羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn))及健康對(duì)照組20例(男17例，女3例，平均年齡40.2±6.3歲)。在電子結(jié)腸鏡下取回盲部及乙狀結(jié)腸粘膜標(biāo)本各2-3塊，行HE染色及免疫組化CD11c標(biāo)記。低倍鏡(×100)下觀察大腸粘膜DC的分布，高倍鏡

6、(×400)下結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察對(duì)DC進(jìn)行計(jì)數(shù)。每張切片隨機(jī)取10個(gè)不重疊的400倍視野，對(duì)每個(gè)視野中DC數(shù)目及細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均數(shù)，通過(guò)公式得到每DC數(shù)目‰。DC數(shù)目‰=DC總數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×1000‰，結(jié)果采用中位數(shù)(四分位間距)‰表示。比較IBS-D組與健康對(duì)照組在回盲部及乙狀結(jié)腸部粘膜DC數(shù)目的差異。以上結(jié)果采用CHISS軟件，用卡方，雙向有序且屬性不同的資料或秩和檢驗(yàn)的方法進(jìn)行分析，P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 [結(jié)

7、果]IBS-D組血清中針對(duì)雞蛋的IgG抗體陽(yáng)性率是48.6％，對(duì)照組是25.2％，IBS-D組明顯高于健康對(duì)照組(P=0.0007)，對(duì)其他13種食物陽(yáng)性率無(wú)明顯差異(P＞0.05)；血清中針對(duì)雞蛋的IgG抗體的半定量滴度與IBS-D癥狀嚴(yán)重程度無(wú)相關(guān)性(p＞0.05)；IBS-D組血清中具有3種以上食物的IgG抗體的陽(yáng)性率為34.7％，對(duì)照組是20.7％，二者有差異(P=0.0281)。大腸粘膜DC主要分布于粘膜固有層及粘膜下層。正常

8、對(duì)照組回盲部DC數(shù)目為0.8(0.4)‰，IBS-D組為3(1.3)‰，IBS-D組明顯多于正常對(duì)照組(P=0.000)。正常對(duì)照組乙狀結(jié)腸粘膜DC數(shù)目為0.5(0.2)‰，IBS-組為0.8(0.4)‰，IBS-D組明顯多于正常對(duì)照(P=0.001)。正常對(duì)照組及IBS-D組回盲部粘膜DC數(shù)目均明顯多于乙狀結(jié)腸(P=0.001，P=0.000)。 [結(jié)論]IBS-D組血清中針對(duì)雞蛋的IgG抗體陽(yáng)性率以及具有3種以上食物的IgG