腹瀉型腸易激綜合征患者腸腔內菌群和腸道粘膜相關菌群的變化及意義.pdf

1、第一部分，腹瀉型腸易激綜合征患者腸腔內目標菌群的分析
　　背景及目的：IBS的病因和發(fā)病機制目前尚不明確。國內外許多研究發(fā)現IBS患者腸道菌群改變,益生菌制劑尤其抗生素制劑為IBS臨床治療提供了新思路。所以,腸道菌群紊亂可能是IBS發(fā)病的重要原因之一。
　　腸道菌群分析方法包括傳統細菌培養(yǎng)法和近年來應用的分子生物學檢測法。因腸道內菌群99％為厭氧菌群,而厭氧菌接觸空氣過久就會導致細菌的死亡從而使細菌培養(yǎng)失敗。傳統細菌培養(yǎng)法對

2、標本的采集、送檢條件等要求嚴格,且培養(yǎng)難度較大,檢測的結果受細菌離體時間、外界環(huán)境因素、標本的處理過程及處理時間、培養(yǎng)基性能等諸多影響,由于腸道菌群分析的難度大,特別是糞便厭氧菌培養(yǎng)困難。使得腸道細菌很難準確的定量。因此腸道細菌的研究成為臨床開展的難點。本研究是為了解腹瀉型 IBS患者腸腔內目標均屬的變化情況(即腸道內雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬等有益菌及大腸埃希菌屬、梭菌屬等機會致病菌的變化情況),尋找腸道菌群紊亂的客觀依據,證實腹瀉型IB

3、S患者存在腸道菌群的紊亂。
　　方法：實時熒光定量PCR法檢測50名腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)及25名正常對照者腸腔內糞便中雙歧桿菌屬、乳酸桿菌屬、擬桿菌屬、梭菌屬、大腸埃希菌屬和腸球菌屬的數量,并對各組的目標菌數量進行比較,計算腸道定值抗力(B/E值)。
　　結果：與對照組相比,腹瀉型IBS患者組糞便中代表大腸埃希菌屬的大腸埃希菌、代表梭菌屬的產氣莢膜梭菌的數量明顯增多(9.89±0.59 vs8.33±0.27,1

4、1.40±0.42 vs10.83±0.33,P<0.05),而代表乳酸桿菌屬的嗜酸乳桿菌及代表雙歧桿菌屬的長雙歧桿菌數量明顯減少(8.85±0.29 vs9.10±3.56,9.35±0.36 vs9.95±1.15,P<0.05),代表腸球菌屬的糞腸球菌、代表擬桿菌屬的脆弱擬桿菌在兩組之間差異無統計學意義。腹瀉型IBS患者腸道定值力(B/E)<1,與對照組相比明顯降低(0.95±0.06 vs1.20±0.16,P<0.05)。

5、r>　　結論：(1)IBS-D患者腸道6種菌群存在變化,提示IBS-D患者腔菌群存在改變。(2)IBS-D患者腔菌群中B/E下降,提示腸道定植抗力均下降。
　　第二部分，腹瀉型腸易激綜合征患者腸粘膜相關菌群的研究
　　背景及目的：最近的研究表明,腸道菌群的改變在腸易激綜合征(IBS)的病理生理中起著重要作用。為了進一步了解腸道菌群在 IBS的病理生理所起的作用,一些研究正在關注 IBS患者腸道復雜的微生物群落。而腸道菌群不僅

6、包括腔內菌群還包括腸粘膜相關菌群,目前多數的研究是通過對糞便菌群的分析來了解腔內菌群的,對于腸粘膜相關菌群主要是通過空腸上段抽吸物培養(yǎng)法和氫氣呼氣實驗(HBT)來診斷小腸細菌過度生長(SIBO),對于末端回腸粘膜腸道菌群分析的相關報道較少。由于腸粘膜相關微生物菌落可能更直接影響著宿主的免疫功能、病理生理及神經系統,同時腸粘膜上皮和腔內的微生態(tài)環(huán)境也有所區(qū)別,所以腸粘膜相關菌群的研究意義較大,因空腸上段粘膜采集需要十二指腸鏡或小腸鏡才能完

7、成,相對較困難,故本研究擬在大腸鏡檢查中采集腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)患者和對照組的乙狀結腸近端腸粘膜,用于比較兩組間的6種菌屬的差異。
　　方法：30例符合羅馬Ⅲ標準的IBS-D患者和15例正常對照者入選該實驗,實時熒光定量法分別檢測兩組乙狀結腸粘膜中的雙歧桿菌屬、嗜酸乳桿菌屬、擬桿菌屬、梭菌屬、大腸埃希菌屬和腸球菌屬的數量,并對各組的目標菌數量進行比較,同時計算腸道定值抗力B/E值。
　　結果：與對照組相比,腹瀉型

8、腸易激綜合征組乙狀結腸粘膜大腸埃希菌、脆弱擬桿菌和產氣莢膜梭菌均明顯增加(9.59±0.97 vs8.43±0.61,9.18±1.51 vs9.15±0.79,10.33±0.64 vs9.56±0.31,均 P<0.05),長雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌均明顯減少(9.32±1.11 vs9.98±0.68,7.40±0.95 vs9.52±0.52,均P<0.05),腸道定植抗力(B/E值)明顯減低(0.98±0.12 vs1.15±0.