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1、目的:應(yīng)用RNA干擾方法特異性地降低胚胎干細(xì)胞中Nanog的表達(dá)。 方法:設(shè)計(jì)并合成四條針對(duì)Nanog序列的干擾片斷,利用Cy3標(biāo)記siRNA,利用流式方法檢測(cè)siRNA的轉(zhuǎn)染效率。siRNA轉(zhuǎn)染J1細(xì)胞后,利用RT-PCR、Real-TimePCR、Western—Blot方法檢測(cè)各個(gè)片斷對(duì)J1細(xì)胞中Nanog表達(dá)的影響。 結(jié)果:lRT-PCR結(jié)果顯示在這四個(gè)片斷中Nanog-P1、Nanog-P4能夠比較明顯地降
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