小鼠胚胎干細(xì)胞建系及人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系的建立初探.pdf

1、胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcells，ESC)是從植入前的胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(Innermasscells，ICM)或原始生殖細(xì)胞(Primordialgermcells，PGCs)分離和克隆的具有多潛能性細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)為研究細(xì)胞分化，動(dòng)物和人發(fā)育機(jī)制，闡明基因功能，篩選藥物，細(xì)胞治療疑難雜癥等開(kāi)辟了廣闊的空間。胚胎干細(xì)胞的建系工作，是任何干細(xì)胞研究的基礎(chǔ)。優(yōu)良的建系方法和穩(wěn)定的培養(yǎng)體系，為后期各種實(shí)驗(yàn)鋪墊了道路。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)

2、行了大量的方法和技術(shù)上的探索，旨在建立小鼠和人胚胎干細(xì)胞系。 本文闡述了人胚胎干細(xì)胞建系的研究進(jìn)展。其建系和維持過(guò)程中，胚胎材料來(lái)源、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離、擴(kuò)增傳代、凍存復(fù)蘇等均為難點(diǎn)。從鼠源飼養(yǎng)層、人源飼養(yǎng)層到無(wú)飼養(yǎng)層培養(yǎng)系統(tǒng)的發(fā)展，以及體細(xì)胞核移植技術(shù)平臺(tái)的建立，奠定了治療性克隆的基礎(chǔ)。同時(shí)，從進(jìn)一步闡述了胚胎干細(xì)胞保持自我更新的分子機(jī)制的研究進(jìn)展，旨在從分子層面了解生長(zhǎng)和分化的原因并進(jìn)一步探索好的建系方法。胚胎干細(xì)胞通過(guò)特殊內(nèi)源性

3、分子的表達(dá)，以及微環(huán)境中多種細(xì)胞因子和胞外基質(zhì)的刺激，構(gòu)成信號(hào)網(wǎng)絡(luò)，共同調(diào)控自我更新。近年來(lái)，通過(guò)對(duì)Oct3/4、Nanog等胚胎干細(xì)胞特殊分子標(biāo)記，以及LIF-STAT3，Wnt-β-連環(huán)素，BMP-Id，bFGF等信號(hào)通路的研究，探討了胚胎干細(xì)胞自我更新信號(hào)網(wǎng)絡(luò)的分子機(jī)制。維持自我更新的關(guān)鍵在于胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng)微環(huán)境中的各種細(xì)胞因子和胞外基質(zhì)的含量，以及細(xì)胞內(nèi)源性特異分子表達(dá)量之間的平衡。最后，筆者就人胚胎的來(lái)源、胚胎干細(xì)胞的研究目的