放線菌I03A-02842的篩選、活性產物的分離純化以及Sansanmycins次要組分的研究.pdf

1、本論文主要包括兩方面的工作：一是抗結核微生物103A-02842篩選和發(fā)酵產物的分離純化；二是抗結核抗生素Sansanmycin D、E組分的分離純化、結構鑒定。 抗結核微生物103A-02842的篩選和發(fā)酵產物的分離純化：細菌中DNA拓撲異構酶Ⅱ有A、B兩個亞基。A亞基是喹諾酮類藥物的作用靶點。B亞基是新型抗結核藥物的篩選靶點，以此亞基為靶點建立的篩選模型，可以避免篩選到的活性成分與喹諾酮類藥物產生交叉耐藥。肖春玲教授以B亞基

2、為靶點篩選到103A系列菌株。我們通過大孔樹脂4006柱層析、8個溶媒系統(tǒng)的紙層析、抗菌活性的初步測定，從該系列中的28個備選菌株中挑選到產生活性物質的菌株103A-02842。發(fā)酵液處理后經大孔樹脂4006、強酸性陽離子樹脂1×3，得到l×3樹脂的流出液與洗脫液。流出液(主要含脂溶性組分)經中性乙酸乙酯萃取，薄層層析，得到兩個活性化合物A、B，經LC-MS(高壓液相一質譜聯(lián)用)測得分子量為612、626。由于含量較少，結構鑒定有待于進

3、一步的研究。洗脫液中主要含水溶性組分，對草分枝桿菌、革蘭氏陽性細菌均有活性，采用SP-Sephadex-C-25葡聚糖凝膠柱層析、ODS柱柱層析對其中活性成分的分離進行了初步探索。由于洗脫液中活性成分的含量很低，所以未能得到足量的樣品以供分析鑒定。 抗結核抗生素Sansanmycins次要組分的分離純化、結構鑒定：通過大孔吸附樹脂柱層析、ODS柱柱層析、制備型HPLC等方法得到兩個次要組分Sansanmycin D和E。通過質譜