急性呼吸道感染住院兒童中人偏肺病毒感染的初步研究.pdf

1、在兒科，以往的研究已證實人類呼吸道合胞病毒（hRSV）、流感病毒、副流感病毒及腺病毒是下呼吸道感染的主要病原，仍有約1/3的病原不明。2001 年荷蘭學(xué)者Hoogen等報告他們發(fā)現(xiàn)了一類與人類，特別是嬰幼兒呼吸道感染有關(guān)的新的病毒—人類偏肺病毒（human metapneumovirus，hMPV）。目前hMPV感染在世界各地相繼有報道，提示該病毒是世界范圍內(nèi)普遍存在的人類致病原。因此，有必要在各地區(qū)對其臨床流行特征作調(diào)查。呼吸道病毒感

2、染的診斷有四種主要方法，包括病毒的分離培養(yǎng)、抗原檢測、RNA或DNA檢測、血清學(xué)檢測。在過去的研究中，病毒的分離培養(yǎng)、RT－PCR、血清學(xué)檢測已用于hMPV感染的診斷。病毒分離培養(yǎng)雖然特異性高，但是hMPV尚未發(fā)現(xiàn)最適生長的細(xì)胞。血清學(xué)檢測能區(qū)別hMPV原發(fā)感染與再次感染，但是不能早期診斷hMPV感染。因此，RT－PCR被認(rèn)為是目前最敏感及特異的診斷方法，但是需在特殊實驗室才能完成，且需6小時以上才能獲得結(jié)果。免疫熒光法與酶聯(lián)免疫特異性

3、測定（ELISA），這兩種快速檢測抗原的方法是可行的。已有報道小鼠抗hMPV多克隆抗體的ELISA方法檢測培養(yǎng)的hMPV感染細(xì)胞的hMPV抗原，然而，對臨床標(biāo)本的hMPV抗原檢測尚乏研究。呼吸道上皮細(xì)胞的免疫熒光法檢測已證實對其它的呼吸道病毒（如呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒、副流感病毒）是一種非常有效的方法。 關(guān)于間接免疫熒光抗體法（IFA）檢測鼻咽分泌物中hMPV抗原國內(nèi)未見報道。而且，IFA適用于hMPV感染早期診斷，簡

4、便快速，易在臨床上廣泛應(yīng)用。因此，我們用IFA法診斷hMPV感染并調(diào)查西安地區(qū)hMPV的臨床流行特征。 方法 收集2006年11月至2007年2月我院兒科中心的112例急性呼吸道感染住院患兒的鼻咽分泌物標(biāo)本，患兒入院后48h內(nèi)用無菌拭子采集鼻咽分泌物，立即置于冰上，迅速轉(zhuǎn)運至實驗室。用直接免疫熒光抗體法（DFA）檢測常見的7 種呼吸道病毒（包括呼吸道合胞病毒，甲、乙型流感病毒，I、II、III 型副流感病毒和腺病毒），對

5、其中65例常見7種呼吸道病毒特異性抗原陰性患兒鼻咽分泌物用IFA法檢測hMPV抗原。所有患兒的臨床資料包括性別、年齡、臨床表現(xiàn)、實驗室檢查在出院后作病案回顧性分析。 結(jié)果 1. 在×400放大的熒光顯微鏡下1滴細(xì)胞涂片中至少有100多個上皮細(xì)胞，陽性結(jié)果為至少1個細(xì)胞有特異性染色（明亮的黃綠色熒光）。 2. hMPV檢測陽性率65份標(biāo)本中用IFA方法檢測hMPV陽性數(shù)8例，陽性率為12.31％。其中2006年11

6、月份陽性檢出率為14.29％（3/21），12月份為11.76％（2/17），2007年1月份為15.79％（3/19），2月份未檢出（0/8）。 3. 年齡組感染率8例感染患兒中男5例，女3例，年齡范圍6個月~5歲9個月。兒童中≤5歲年齡組40例，陽性6例, 感染率為15％；6～14歲年齡組25例，陽性2例，感染率8％，兩年齡組hMPV感染率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2 = 0.7，P > 0.05）。 4. 臨床表現(xiàn)及實驗

7、室檢查8例陽性患者中75％的表現(xiàn)有發(fā)熱（≥38.0 ℃），87.5％有咳嗽，37.5％氣喘。其中≤5歲年齡組6例中有6例咳嗽、4例發(fā)熱、3例氣喘； 6～14歲年齡組2例中有2例咳嗽、2例高熱、1例咽痛、1例驚厥。2例肺炎患兒X線胸片顯示雙肺野斑點或斑片狀滲出陰影，肺部聽診可聞及濕啰音。4例患兒CK-MB異常。所有患兒均好轉(zhuǎn)或治愈出院。 5. 臨床診斷臨床診斷肺炎者為2例，喘息性支氣管炎為1例，支氣管炎為4例，上感為1例?！?歲年

8、齡組6例中有2例肺炎、3例支氣管炎、1例喘息性支氣管炎；6～14歲年齡組2例中有1例支氣管炎、1例上呼吸道感染。 結(jié)論 1. 我們的研究表明用抗hMPV的小鼠單克隆抗體進行IFA能檢測到鼻咽分泌物中的hMPV抗原。IFA適用于hMPV感染早期診斷，簡便快速，4h出結(jié)果，易在臨床上廣泛應(yīng)用。在本研究中，我們證實IFA對hMPV感染診斷是一種快速且有效的方法。 2. 本研究結(jié)果顯示hMPV在常見7種呼吸道病毒檢測陰性

9、的呼吸道標(biāo)本中陽性率為12.31％，提示本研究中hMPV與患者的急性呼吸道感染有關(guān)，這說明西安地區(qū)兒童也存在hMPV感染，hMPV同樣是國內(nèi)呼吸道感染兒童重要的病原體。 3. 感染率的差異可能與研究時期、研究人群及地域不同有關(guān)。而且，目前的研究可能低估了該病毒的感染率，因為研究是在常見7種呼吸道病毒陰性的標(biāo)本中再檢測hMPV。 4. 我們的研究表明hMPV可引起6月-6歲年齡段兒童的感染，其中5歲及以下患兒占75％。易感