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文檔簡介
1、目的:本實驗為了探討不同的卵母細胞非離體存放時間和存放的環(huán)境溫度變化對小鼠卵巢內(nèi)卵母細胞存活與體外成熟的影響
方法:8周齡的ICR品系雌鼠隨機分組,每組5只。利用二氧化碳安樂死方法處死后將尸體存放在室溫(25℃),低溫(4℃)和高溫(37℃)環(huán)境里一定時間(0,2,4,6,8和10h)后摘取卵巢組織剁碎后收集生發(fā)泡(GV)期卵母細胞。隨后對收集到的卵母細胞進行形態(tài)學檢測,并統(tǒng)計每組GV期卵母細胞的數(shù)目,同時對其體外培養(yǎng)過程中的
2、成熟率以及后續(xù)卵母細胞染色體和紡錘體還有細胞質(zhì)中線粒體的分布和谷胱甘肽(GSH)含量也進行檢測。
結(jié)果:1室溫(25℃)下小鼠尸體可以存放至4小時并收集到 GV期卵母細胞,低溫(4℃)環(huán)境中可以存放至10小時,而高溫(37℃)組中只能存放1小時。2我們統(tǒng)計了不同條件下GV期卵母細胞的數(shù)目,結(jié)果顯示在同一溫度下,隨著存放時間延長,收集到的GV期卵母細胞總數(shù)目隨之減少。3在存放相同時間的情況下,收集到的GV期卵母細胞體外培養(yǎng)成熟過
3、程中其生發(fā)泡破裂(GVBD)比率和第一極體(PB)排出比率也隨著存放溫度的升高而降低。4結(jié)果發(fā)現(xiàn)各實驗組中細胞質(zhì)內(nèi)不正常線粒體的分布比率遠遠高于對照組,但是卵母細胞細胞質(zhì)中 GSH含量并沒有明顯差異。5實驗組中卵母細胞內(nèi)染色體排列和紡錘體組裝過程都與對照組一致。
結(jié)論:1小鼠死后滯留影響了 GV期卵母細胞的存活數(shù)目。2小鼠死后滯留的低溫環(huán)境可以延長尸體的存放時間,但是高溫環(huán)境則減少存放時間。3小鼠死后滯留影響了卵母細胞體外成熟
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