安徽省部分地區(qū)漢族人家族性與散發(fā)性肥厚型心肌病MYH7基因18及20號外顯子突變分析.pdf

1、背景：家族性肥厚型心肌病(famlial hypertrophic cardiomyopathy，F(xiàn)HCM)是一種常染色體顯性遺傳病，單一責(zé)任等位基因突變即可致病。全部病例報道中家族性患者約為50％，散發(fā)病例約占45％。近年來的研究已發(fā)現(xiàn)FHCM有至少15種致病責(zé)任基因，其中約30％～50％的FHCM是由MYH7基因突變所致。同時有研究顯示散發(fā)性肥厚型心肌病(sporadic hypertrophic cardiomyopalthy，S

2、HCM)也存在遺傳學(xué)基礎(chǔ)，而且還可能與FHCM具有相似的發(fā)病機制。 目的：目前尚無安徽地區(qū)HCM致病基因分布、基因型等的研究。我們選擇MYH7基因為候選基因，對3個無血緣關(guān)系的安徽地區(qū)漢族FHCM患者M(jìn)YH7基因3-26外顯子DNA進(jìn)行直接測序，了解安徽地區(qū)漢族FHCM的MYH7基因的突變情況，并探討散發(fā)性HCM的可能發(fā)病機制。 方法：收集安徽地區(qū)3個無血緣關(guān)系的漢族HCM共8名患者，分別來自安徽省東部、西部和北方。3例

3、先證者中，男2例，女1例，年齡21-54歲。散發(fā)病例20例，男12例，女8例，年齡40-70歲，平均年齡50.4歲。用碘化鉀法常規(guī)提取外周靜脈血白細(xì)胞DNA，于-20℃保存。根據(jù)文獻(xiàn)報道設(shè)計MYH7基因3-26號外顯子含側(cè)翼內(nèi)含子序列的引物…[1]。按雙脫氧末端終止法進(jìn)行測序，測序引物與PCR引物相同。18號外顯子目的片段大小為443bp，20號外顯子目的片段大小為331bp。應(yīng)用發(fā)牛突變的18號、20外顯子同一序列引物擴(kuò)增陽性家系中所

4、有成員的DNA目的片段，并測序。應(yīng)用發(fā)生突變的18號、20號外顯子同一序列引物擴(kuò)增20例散發(fā)HCM患者的目的片段并測序。運用chromas程序及Nucl eic Acids Research提供的正常人MYH7基因Exonl8、Exon20序列來比對測序結(jié)果，確定突變位點。 結(jié)果：在3個FHCM家系8例患者中，有2個家系2例先證者發(fā)現(xiàn)MYH7基因20號及18號外顯子發(fā)生突變，分別為AⅢ-1中20號外顯子發(fā)生Arg723GIY突變

5、；BI-2中18號外顯子發(fā)生Arg663His突變。家系C先證者及家系成員未發(fā)現(xiàn)MYH7基因突變。應(yīng)用MYH7基因20號外顯子、18號外顯子的引物序列，擴(kuò)增家系A(chǔ)、B各自家系中其他成員(無論是否患病)DNA及應(yīng)用MYH7基因20號外顯子引物序列擴(kuò)增散發(fā)性HCM基因突變者家族成員的DNA。家系A(chǔ)中AⅡ1、.AⅢ-2均發(fā)現(xiàn)Arg723Gly突變。所有臨床診斷HCM的患者(A Ⅱ-1、AⅢ-2)均在20號外顯子的同一位點發(fā)生相同突變，而家系中

6、其他正常人未發(fā)現(xiàn)該突變或攜帶該突變。家系B中健在的其他人員除先證者外，其子及侄也攜帶同樣突變即18號外顯子發(fā)生Arg663His突變，余未見相同突變。散發(fā)的20例HCM患者中，有1例發(fā)現(xiàn)MYH7基因的20號外顯子上發(fā)生Ile736Thr突變，未發(fā)現(xiàn)18號外顯子發(fā)生突變。應(yīng)用MYH7基因20號外顯子引物序列擴(kuò)增散發(fā)性HCM基因突變者家族成員的DNA并測序，未見相同突變或攜帶者。 結(jié)論： MYH7基因可能是安徽地區(qū)FHCM的常見突變