肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床病理意義.pdf

1、目的：研究肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶（peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting1，Pin1）、死亡相關(guān)蛋白激酶1（Death-associated protein kinase1，DAPK1）及β-連環(huán)蛋白（β-catenin）在肝細(xì)胞癌（hepatocelluler carcinoma，HC C）中的表達(dá)情況，并分析其臨床病理意義。
　　方法：
　　1、采用實(shí)時熒光

2、定量聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time PCR）技術(shù)，從mRNA水平上檢測34例HCC及相應(yīng)遠(yuǎn)癌肝組織中Pin1的表達(dá)情況
　　2、采用蛋白免疫印跡（Western Blot）方法在蛋白質(zhì)水平上分別檢測了29例HCC及癌旁正常肝組織中Pin1、DAPK1及β-catenin的蛋白表達(dá)情況；
　　3、采用免疫組織化學(xué)染色（IHC）方法結(jié)合組織芯片技術(shù)，檢測184例HCC、癌旁肝組織中Pin1、DAPK1及β-catenin的蛋白

3、表達(dá)情況；并分析上述蛋白表達(dá)的相關(guān)性、與HC C臨床病理參數(shù)的關(guān)系，及其在預(yù)后評估中的價值。
　　結(jié)果：
　　1、Real-time PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)Pin1mRNA在34例HCC中的相對表達(dá)量（Relative quantity，RQ）為0.866±0.620，而相應(yīng)癌旁正常肝組織的相對表達(dá)量1±0，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.359）。
　　2、Western Blot結(jié)果顯示，HCC中Pin1蛋白的平均表達(dá)量（1.3

4、22±0.977）高于相應(yīng)癌旁肝組織（0.753±0.594），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）；HCC中DAPK1蛋白的表達(dá)量（0.523±0.435）低于相應(yīng)癌旁肝組織（1.291±1.185），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.019）；HCC中β-catenin蛋白的表達(dá)量（1.532±0.618）明顯高于相應(yīng)癌旁肝組織（0.995±0.291）（P=0.021）。
　　3、免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，47.8％（88/184）的

5、HCC出現(xiàn)Pin1蛋白陽性，定位于胞質(zhì)和（或）胞核，明顯高于癌旁組35.9%（66/184），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），并且Pin1隨著腫瘤分化程度的降低，Pin1蛋白的表達(dá)逐漸升高（P=0.001）；DAPK1主要定位于胞質(zhì)，在HCC的陽性率為31%（57/184），低于癌旁組的陽性率62.5%（115/184），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）；有77.7%(143/184)的HCC出現(xiàn)β-catenin異常表達(dá)（包

6、括胞膜缺失表達(dá)和胞質(zhì)、胞核異位表達(dá)），明顯高于癌旁組52.7%(97/184)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)學(xué)意義（P=0.003），同時β-catenin的異常表達(dá)腫瘤直徑存在正相關(guān)（P=0.034）。Spearman秩相關(guān)分析顯示，Pin1的表達(dá)與DAPK1呈負(fù)相關(guān)（r=﹣0.462，P<0.001），和β-catenin呈正相關(guān)（r=0.202，P=0.006），DAPK1的表達(dá)與β-catenin呈負(fù)相關(guān)（r=﹣0.255，P=0.001）

7、。
　　4、Kaplan-Meier和Cox生存分析顯示，HCC中Pin1和DAPK1的蛋白表達(dá)均和HCC患者的無瘤生存時間相關(guān)（P=0.017和P=0.012），Pin1蛋白表達(dá)、DAPK1表達(dá)是能夠反映肝癌患者無瘤生存期的獨(dú)立危險因素（P=0.025和P=0.002）；HCC中β-catenin的表達(dá)與HCC患者的總生存時間相關(guān)（P=0.027），β-catenin表達(dá)是能夠反映肝癌患者總生存期的獨(dú)立危險因素（P=0.016）