GPC3在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義的研究.pdf

1、1.目的：檢測血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(Glypican-3,GPC3)的表達(dá)，探討其在肝細(xì)胞癌(HCC)中的診斷價值，并探討GPC3mRNA和GPC3蛋白在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)情況及其臨床意義。
　　 2.方法和結(jié)果：
　　 本研究分兩部分。
　　 第一部分是探討血清GPC3蛋白測定對HCC的診斷價值。運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，檢測了67例HCC、41例肝硬化和30例正常人血清GPC3，結(jié)果顯示HCC

2、病人血清中GPC3蛋白濃度(10.85±0.58μg/L)明顯高于肝硬化組(2.45±0.61μg/L)和正常組(1.14±0.22μg/L)。以3μg/L為診斷界值，血清GPC3蛋白診斷HCC的敏感性和特異性分別為：88.1％和85.9％。當(dāng)AFP以20μg/L為診斷界值時，其對HCC的敏感性和特異性為別為：65.7％和76.2％。GPC3對HCC診斷的敏感性顯著高于AFP(P=0.001)。在23例AFP陰性HCC患者中有17例GP

3、C3陽性，陽性率為73.9％(17/23)。GPC3的ROC曲線下面積大于AFP(0.898 vs 0.814)。聯(lián)合AFP和GPC3對HCC的敏感性和特異性分別為91.0％和70.4％。
　　 本研究第二部分是研究GPC3mRNA及蛋白在HCC中的表達(dá)及臨床意義。運(yùn)用RT-PCR和免疫組化(IHC)共檢測了59例HCC組織及其癌旁組織、10例肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌組織、11例肝硬化肝組織、14例正常肝組織(肝血管瘤旁)中GPC3mRN

4、A及蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示：GPC3mRNA在HCC組織中的陽性率為83.1％(49/59)，明顯高于癌旁組織35.6％(21/59)(x2=27.53，P=0.0001)。GPC3蛋白在HCC中的陽性率為78.0％(46/59)，也明顯高于癌旁陽性率32.2％(19/59)(x2=24.97，P=0.0001)。而GPC3mRNA及蛋白在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌、肝硬化和正常肝組織中不表達(dá)。單因素分析顯示AFP≥20μg/L、腫瘤病理分級和腫瘤包

5、膜的完整性與GPC3蛋白表達(dá)有關(guān)(P＜0.05)。多自變Logistic回歸分析，顯示AFP水平(OR=0.060，95％CI：0.011～0.336，P=0.001)和腫瘤的病理分級(OR=0.191，95％CI：0.038～0.954，P=0.044)是影響GPC3蛋白在HCC中表達(dá)的獨(dú)立因素。Spearmen相關(guān)分析顯示腫瘤病理分級與GPC3表達(dá)的程度明顯相關(guān)(R=0.315，P=0.015)。Kaplan-Meier生存分析顯示

6、在HCC組織中GPC3(+)組病人的1年無瘤生存率明顯低于GPC3(-)組(33.6％ vs 72.7％，P=0.028)；癌旁組織GPC3(+)組病人的1年無瘤生存率也低于GPC3(-)組(23.5％ vs 40.1％，P=0.023)；隨著GPC3在HCC組織中表達(dá)強(qiáng)度的增加，患者的無瘤生存率也明顯降低。Cox風(fēng)險回歸模型分析，結(jié)果顯示腫瘤AFP陽性(OR=0.372，95％CI：0.140～0.90，P=0.048)、腫瘤大小(O

7、R=5.215，95％CI：1.737～15.656，P=0.003)、癌旁組織GPC3表達(dá)(OR=0.226，95％CI：0.085～0.599，P=0.003)、腫瘤GPC3表達(dá)的強(qiáng)度(OR=1.946，95％CI：1.080～3.507，P=0.027)是影響患者術(shù)后無瘤生存率的獨(dú)立危險因素。
　　 3.結(jié)論：
　　 (1).血清GPC3蛋白對HCC診斷的敏感性和特異性分別為88.1％和85.9％，明顯優(yōu)于AFP，