RHAMM在肝細胞癌組織中的表達及臨床意義.pdf

1、目的：通過研究RHAMM(Receptor for hyaluronic acid(HA)-mediated motility)在肝細胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)患者肝癌組織及其相應(yīng)癌旁肝組織(adjacent normal liver tissues，ANLT)中的表達情況，進一步分析RHAMM的表達與臨床病理特征參數(shù)之間的關(guān)系，探討RHAMM的表達在肝癌早期診斷、患者預(yù)后的臨床意義。
　　方

2、法：收集經(jīng)過手術(shù)治療的肝細胞癌患者的癌組織187例及其相應(yīng)的癌旁肝組織187例，肝血管瘤患者瘤旁正常肝組織10例。利用Real time PCR(RT-PCR)技術(shù)在mRNA水平上檢測RHAMM在187對肝癌患者癌組織及其癌旁肝組織、10例正常肝組織中的轉(zhuǎn)錄情況。利用免疫組織化學(xué)方法在蛋白水平上檢測RHAMM在25對肝癌組織及癌旁肝組織、10例正常肝組織中的表達情況及組織、細胞中的表達位置。利用Western-blot方法在蛋白水平上檢

3、測RHAMM在32對肝癌組織及癌旁肝組織、10例正常肝組織中的表達情況。使用統(tǒng)計學(xué)方法對以上實驗結(jié)果進行分析，RHAMM的表達水平在不同組間使用t檢驗，并用x2檢驗分析RHAMM的表達與TNM分期(Tumor node metastasis)、腫瘤侵襲及復(fù)發(fā)等之間相關(guān)性分析。用Kaplan-Meier生存曲線分析RHAMM的表達與腫瘤患者術(shù)后的無瘤生存率及總生存率之間的關(guān)系，并用對數(shù)秩檢驗進行校驗。
　　結(jié)果：⑴RHAMM mRN

4、A在187對癌組織中的表達水平與其對應(yīng)的癌旁組織中的表達水平相比較，其中123(65.8％)例樣本的RHAMM mRNA-表達明顯上調(diào)，而64(34.2％)例的表達呈下調(diào)狀態(tài)(p＜0.001)。免疫組織化學(xué)方法檢測的25對樣品中，其中的18(72％)例肝癌組織中的RHAMM的表達水平與其相應(yīng)的癌旁肝組織相比呈明顯的過表達狀態(tài)(p=0.023)。Western-blot檢測的32對樣品中，其中的24(75％)例肝癌組織中的RHAMM的表達

5、水平與其相應(yīng)的癌旁肝組織相比呈明顯的過表達狀態(tài)(p=0.031)。⑵RHAMM表達水平的升高與肝癌患者腫瘤的TNM分期、血管侵犯、及術(shù)后復(fù)發(fā)密切相關(guān)。TNM分期為Ⅲ-Ⅳ(x2=5.476，p=0.019，Table1)、存在血管侵犯(x2=5.327，p=0.021，Table1)、術(shù)后有復(fù)發(fā)(x2=4.578，p=0.032，Table1)的患者其RHAMM的表達水平明顯升高。與患者年齡（年齡≥55歲或＜55歲）、性別、家族史、乙型肝

6、炎病毒表面抗原、血清AFP水平(≥20 ng/mL或＜20ng/mL)、腫瘤的大小(直徑≥5 cm或＜5 cm)、腫瘤的數(shù)目、飲酒史、是否存在肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、及淋巴轉(zhuǎn)移無關(guān)(p＞0.05)。⑶RHAMM過表達、腫瘤直徑≥5 cm、多發(fā)性肝癌、TNM分期為Ⅲ-Ⅳ以及存在血管侵犯均與肝癌患者術(shù)后的短無瘤生存時間及短總生存時間之間密切相關(guān)(p＜0.01)。⑷RHAMM高表達(風(fēng)險比中位數(shù)1.574，95％ CI1.025-2.419，p=

7、0.038)、腫瘤直徑≥5 cm(風(fēng)險比中位數(shù)1.964，95％CI1.188-3.247，p=0.008)、TNM分期為Ⅲ-Ⅳ(風(fēng)險比中位數(shù)1.865，95％ CI1.157-3.007，p=0.011)皆可作為肝癌患者術(shù)后無瘤生存時間的預(yù)測因子。RHAMM高表達(風(fēng)險比中位數(shù)1.739，95％ CI1.129-2.680，p=0.012)、腫瘤直徑≥5cm(風(fēng)險比中位數(shù)，1.738;95％ CI1.054-2.867，p=0.030

8、)、TNM分期為Ⅲ-Ⅳ(風(fēng)險比中位數(shù)，1.775，95％ CI1.109-2.843，p=0.017)、存在血管侵犯（風(fēng)險比中位數(shù)1.599，95％ CI1.053-2.427，p=0.027）、復(fù)發(fā)(風(fēng)險比中位數(shù)，1.739，95％ CI1.129-2.680，p＜0.001)等各參數(shù)均可作為肝癌患者術(shù)后總生存時間的獨立預(yù)測因子。
　　結(jié)論：①RHAMM表達的上調(diào)與肝癌患者的TNM分期、肝癌細胞的血管侵犯、及腫瘤的復(fù)發(fā)之間有密切