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1、目的:研究ACC2抑制劑對(duì)非酒精性脂肪性肝病的干預(yù)作用并探討其相關(guān)機(jī)制。 方法:以正常人肝細(xì)胞株HL-7702(ucp2)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,采用臨床常用靜脈營(yíng)養(yǎng)藥物脂肪乳劑加入細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)肝細(xì)胞48h,建立NAFL體外細(xì)胞模型,油酸處理NAFL模型細(xì)胞30min,建立NASH模型,并用ACC2抑制劑對(duì)該NAFLD體外細(xì)胞模型進(jìn)行干預(yù),24h后觀察細(xì)胞活性、生長(zhǎng)狀況、細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積情況、細(xì)胞內(nèi)TG含量以及培養(yǎng)液中ALT、AST泄漏量
2、,并檢測(cè)細(xì)胞ACC2活性、丙二酰輔酶A含量和CPTI活性。 結(jié)果:脂肪乳劑(0.5μl/ml)處理的細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,轉(zhuǎn)氨酶較之正常對(duì)照組無(wú)明顯差異(p>0.05),油紅0染色顯示模型組肝細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴,正常對(duì)照組則無(wú)明顯脂滴堆積,細(xì)胞內(nèi)TG含量明顯高于正常組(p<0.01),成功制備出NAFL模型;油酸(0.125μl/ml)處理后NAFL模型細(xì)胞活性下降,可見(jiàn)壞死細(xì)胞,轉(zhuǎn)氨酶泄漏量較正常對(duì)照組明顯增多(p<0.01)
3、,成功制備N(xiāo)ASH模型;ACC2抑制劑作用的NAFL模型實(shí)驗(yàn)組,24h后檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)TG含量與模型對(duì)照組細(xì)胞有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),低于模型對(duì)照組,油紅0染色亦支持本結(jié)果,轉(zhuǎn)氨酶泄漏量無(wú)明顯差異(p>0.05),細(xì)胞ACC2活性較模型對(duì)照組明顯降低(p<0.01),丙二酰輔酶A含量減少(p<0.01),CPTI活性明顯增加(p<0.01);ACC2抑制劑作用后的NAFL模型組細(xì)胞再以油酸處理,光鏡下觀察壞死細(xì)胞減少,轉(zhuǎn)氨酶泄漏量亦較
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