廣東漢族人群KIR-HLA信號系統(tǒng)多樣性研究.pdf

1、殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(KIR)主要分布于自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)和部分T細(xì)胞，可以特異性識別人類白細(xì)胞抗原(HLA)-Ⅰ類抗原，二者的結(jié)合構(gòu)成了KIR-HLA信號系統(tǒng)，調(diào)控NK細(xì)胞和部分T細(xì)胞的殺傷功能。KIR分為兩大部分，包括活化性KIR(aKIR)和抑制性KIR(iKIR)，其中iKIR的功能占主要地位。KIR具有高度的多態(tài)性，有明顯的種族差異。臨床觀察表明，KIR與多種疾病相關(guān)，包括病毒感染、腫瘤、自身免疫性疾病等。造血干細(xì)胞

2、移植(HSCT)中觀察到，若供者的iKIR不能被受者HLA識別，將會形成KIR錯配(KIRmismatch)，影響移植的預(yù)后。本研究旨在了解KIR-HLA信號系統(tǒng)在廣東漢族正常人群和白血病人群中的分布，并觀察供者aKIR對HSCT預(yù)后的影響。 實驗方法: 一、KIR-HLA信號系統(tǒng)在廣東漢族人群中的分布 83例健康供者，于1996年～2000年在廣州血液中心器官移植配型中心進(jìn)行組織分型，均為廣東地區(qū)漢族人。采靜脈

3、血以復(fù)方枸椽酸鹽抗凝劑(ACD-B)抗凝，-80℃凍存。標(biāo)本解凍后，以QIAampDNA抽提試劑盒提取DNA。HLA-A、B、Cw分型采用序列特異性寡核苷酸探針法，部分采用序列特異性引物擴(kuò)增法。KIR分型采用PCR-SSP法，引物由上海生工公司合成。根據(jù)分型結(jié)果和KIR-HLA間識別的特異性，得出KIR在廣東漢族人群中的表現(xiàn)型頻率，比較與其它人種的差異，并分析不同KIR與其相應(yīng)HLA配體的組合方式在廣東漢族人群中的分布。 二、廣

4、東漢族白血病人群KIR-HLA信號系統(tǒng)的分布 81例血液系統(tǒng)惡性腫瘤患者，均為廣東漢族人，1996年12月～2000年于廣州血液中心器官移植配型中心進(jìn)行組織分型，采靜脈血以ACD-B抗凝，-80℃凍存。DNA抽提、HLA分型、KIR分型方法同第一部分。其中77例有完整的KIR-HLA分型結(jié)果。分析白血病患者的KIR表現(xiàn)型頻率，并與正常廣東漢族人群比較。比較KIR-HLA信號系統(tǒng)在白血病人群和正常人群中的分布。 三、供者a

5、KIR對HSCT預(yù)后的影響 對上述77對HSCT臨床結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，其中18對失訪。對其余59對，回顧性分析其預(yù)后，包括病毒感染、細(xì)菌感染、霉菌感染、急性移植物抗宿主病(aGVHD)的發(fā)生及其程度、死亡情況等。選擇目前已經(jīng)明確功能的aKIR，包括KIR2DS1、KIR2DS2、KIR3DS1，分析供者aKIR對受者移植預(yù)后的影響。 結(jié)論: 1、不同KIR基因在廣東人群中有著不同的表現(xiàn)型頻率。廣東漢族人群KIR

6、基因頻率與其它人種亦有差異。 2、廣東漢族人群中存在KIR-HLA表型分離現(xiàn)象。 3、93.7％的個體表現(xiàn)1種以上的iKIR-HLA配對。6.3％的個體不表現(xiàn)已知的iKIR-HLA配對。11.4％的個體表現(xiàn)aKIR2D而不表現(xiàn)iKIR2D-HLA配對。 4、廣東漢族白血病患者KIR基因表現(xiàn)型頻率與正常人群無顯著性差異。髓系白血病患者表現(xiàn)aKIR2D(+)iKIR2D-HLA-Cw(-)的頻率較正常人顯著降低。