CTLA-4基因多態(tài)性與廣東漢族人群甲狀腺相關性眼病臨床關系分析.pdf

1、目的:甲狀腺相關性眼病(thyoid-associatedophthalmopathy，TAO)又稱內(nèi)分泌突眼，是以眼球后及眶周眼組織的浸潤性病變?yōu)樘卣鞯淖陨砻庖咝约膊?。TAO的多數(shù)臨床癥狀都是由突眼引起，這一病理改變被認為是T淋巴細胞及細胞因子介導的免疫反應刺激成纖維細胞增殖并分泌葡萄糖胺聚糖(glycosaminoglycan，GAG)堆積于眶內(nèi)所致。目前認為：細胞毒性T淋巴細胞相關抗原-4(cytotoxicTlymphocyte

2、associatedantigen4，CTLA-4)可能是體內(nèi)外周T淋巴細胞耐受的主要控制開關。CTLA-4基因外顯子1的49位點A/G多態(tài)性影響著基因產(chǎn)物的表達量，但CTLA-4基因外顯子1的49位點A/G多態(tài)性是否與TAO有關，目前并不清楚。本文通過對廣東地區(qū)漢族人群CTLA-4基因外顯子1的49位點基因型的分布情況進行研究，探討TAO患者中CTLA-4基因外顯子1的49位點A/G多態(tài)性與TAO之間的關系，從分子生物學水平探討TAO

3、的發(fā)病機制。 材料與方法研究對象包括TAO患者45例、格雷夫斯病(Gravesdisease，GD)無眼病患者100例和本院健康體檢中心篩選的無親緣關系的健康體檢者100例。應用聚合酶鏈反應技術(polymerasechainreaction，PCR)，對所有血液標本進行CTLA-4基因外顯子1的49位點A/G酶切位點限制性片斷長度多態(tài)性(restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP)研究

4、，上游引物為：5'-CCACGGCTTCCTTTCTCGTA-3'.下游引物為：5'-AGTCTCACTCACCTTTGCAG-3'，擴增得DNA片段長度為327bp，限制性內(nèi)切酶為BbvⅠ。DNA電泳條帶采用GENEGENIUSGELDOC2000凝膠成像系統(tǒng)掃描成像。 結(jié)果TAO組、GD無眼病組及對照組GG基因型頻率分別為73.3％、51.0％、26.0％，G等位基因頻率分別為84.4％、69.0％、49.0％。TAO組GG

5、基因型頻率、G等位基因頻率均顯著高于GD無眼病組及對照組(P=0.012，P=0.000；P=0.000，P=0.000)；GD無眼病組GG基因型頻率、G等位基因頻率亦均顯著高于對照組(P=0.000，P=0.006)。TAO組、GD無眼病組及對照組AA基因型頻率分別為4.4％、13.0％、28.0％，對照組AA基因型頻率顯著高于TAO組及無眼病組(P=0.001，P=0.009)，但TAO組與無眼病組相比無顯著性差異(P=0.118)

6、。 按性別分層后，TAO組、無眼病組及對照組男性GG基因型頻率分別為83.3％、50.5％、22.9％，G等位基因頻率分別91.7％、68.8％、45.7％，TAO組、無眼病組男性GG基因型頻率及G等位基因頻率均顯著高于對照組(P=0.000，P=0.030；P=0.000，P=0.013)，而TAO組與無眼病組相比無顯著性差異(P=0.053)。TAO組、無眼病組及對照組女性GG基因型頻率分別為69.7％、51.3％、27.7

7、％，G等位基因頻率分別81.1％、69.1％、50.8％，TAO組、無眼病組女性GG基因型頻率及G等位基因頻率均同樣顯著高于對照組(P=0.000，P=0.034；P=0.000，P=0.002)，但TAO組與無眼病組相比亦無顯著性差異(P=0.075)。 TAO組按甲狀腺眼病分級分成5+6級、4級和3級三組進行比較發(fā)現(xiàn)：5+6級、4級和3級GG基因型頻率分別為100.0％、83.3％、66.7％，G等位基因頻率分別為100.0