經(jīng)典Wnt信號(hào)通路與產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　研究產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)過(guò)程中是否存在經(jīng)典Wnt信號(hào)通路活性的激活與變化，觀察Wnt信號(hào)通路激活細(xì)胞與產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)過(guò)程細(xì)胞的增殖、凋亡情況及各類(lèi)干細(xì)胞標(biāo)記分布情況的關(guān)系，探討Wnt信號(hào)通路對(duì)產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)重構(gòu)的可能調(diào)節(jié)效應(yīng)和作用機(jī)制，進(jìn)而為研究子宮內(nèi)膜修復(fù)異常相關(guān)疾病提供治療的新思路。
　　方法：
　　（1）利用雄性Top-Gal工具鼠，經(jīng)遺傳育種制備雌性β-catenin報(bào)告鼠。
　?。?）通過(guò)收

2、集產(chǎn)后不同時(shí)間點(diǎn)β-catenin報(bào)告鼠子宮標(biāo)本，對(duì)其冰凍切片進(jìn)行x-gal染色，觀察產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)過(guò)程中，Wnt/β-catenin信號(hào)通路激活所報(bào)告的β-半乳糖苷酶表達(dá)位置及量的變化；利用TUNEL實(shí)驗(yàn)，原位檢測(cè)產(chǎn)后修復(fù)過(guò)程中子宮內(nèi)膜的凋亡情況；利用酶聯(lián)免疫法（Elisa）檢測(cè)產(chǎn)后不同時(shí)間點(diǎn)β-半乳糖苷酶的活性。
　?。?）收集 C57母鼠產(chǎn)后不同時(shí)間點(diǎn)子宮組織，利用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)產(chǎn)后修復(fù)過(guò)程中有關(guān)細(xì)胞標(biāo)記物 EpCA

3、M（標(biāo)記上皮細(xì)胞）、CD146（標(biāo)記間質(zhì)干細(xì)胞）、PDGF-Rβ（標(biāo)記血管來(lái)源間質(zhì)干細(xì)胞）、ABCG2（標(biāo)記SP細(xì)胞）的變化及核增殖抗原Ki67的表達(dá)情況；利用Real-time PCR技術(shù)分析Wnt信號(hào)通路相關(guān)基因在產(chǎn)后不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況及可能存在的意義。
　　結(jié)果：
　?。?）報(bào)告鼠的子宮內(nèi)膜在產(chǎn)后修復(fù)過(guò)程中，x-gal陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)有一定的組織部位特異性和時(shí)間特異性表達(dá)：主要在腔上皮、近腔側(cè)間質(zhì)和胎盤(pán)結(jié)處表達(dá)，且在產(chǎn)

4、后0h的腔上皮及產(chǎn)后72h的間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)水平最高。
　?。?）Elisa結(jié)果顯示產(chǎn)后β-半乳糖苷酶活性呈梯度下降，于產(chǎn)后96h下降尤甚，與0、12h組有顯著性差異（P﹤0.05）。
　　（3）在產(chǎn)后修復(fù)過(guò)程中，子宮內(nèi)膜上皮和間質(zhì)細(xì)胞增生和凋亡并存。Ki67組化結(jié)果顯示產(chǎn)后72h子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖達(dá)高峰；Tunnel結(jié)果顯示，產(chǎn)后24h子宮內(nèi)膜細(xì)胞凋亡達(dá)高峰。EpCAM在所有的腔上皮和腺上皮表達(dá)，基質(zhì)細(xì)胞中不表達(dá)；PDGF-Rβ

5、僅在子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)，且在產(chǎn)后24h內(nèi)不表達(dá)；CD146在子宮內(nèi)膜上皮和間質(zhì)細(xì)胞中均表達(dá)，且與X-gal陽(yáng)性細(xì)胞在子宮內(nèi)膜腔上皮和間質(zhì)的時(shí)空表達(dá)模式相似：在腔上皮細(xì)胞的表達(dá)，產(chǎn)后修復(fù)72h內(nèi)呈逐漸下降趨勢(shì)；在間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)，產(chǎn)后修復(fù)72h內(nèi)呈上升趨勢(shì)；ABCG2蛋白在產(chǎn)后子宮內(nèi)膜的上皮和間質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)，以間質(zhì)細(xì)胞為主，其表達(dá)隨產(chǎn)后修復(fù)時(shí)間的延長(zhǎng)（96h內(nèi)）逐漸增加。
　　（4）Wnt7a在產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)中有顯著變化：產(chǎn)

6、后72h、96h組與產(chǎn)后0h、12h組相比，表達(dá)明顯增高。
　　結(jié)論：
　?。?）Wnt信號(hào)通路核心介導(dǎo)分子β-catenin可能在產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)中起調(diào)節(jié)作用，Wnt/β-catenin信號(hào)通路的激活可能促進(jìn)子宮內(nèi)膜干細(xì)胞分化，修復(fù)子宮內(nèi)膜。
　　（2）在產(chǎn)后子宮內(nèi)膜修復(fù)過(guò)程中，存在間質(zhì)干細(xì)胞分化為腔上皮細(xì)胞的修復(fù)方式。
　?。?）血管源性的干細(xì)胞可分化為間質(zhì)細(xì)胞對(duì)子宮內(nèi)膜進(jìn)行修復(fù)。
　?。?）Wnt7a