血小板液態(tài)保存過程中代謝及體外功能變化的研究.pdf

1、目前臨床供應的血小板成分主要是常溫(22±2℃)液態(tài)保存的血小板，包括手工制備濃縮血小板和機采血小板。對于液態(tài)保存血小板制品的質(zhì)量評價，除了應符合血液和血液制品常規(guī)檢測項目標準外，主要限定在產(chǎn)品中的血小板得率、白細胞殘留量、紅細胞殘留量及pH值等指標，而缺乏對于血小板保存期內(nèi)主要代謝指標、體外功能狀態(tài)的具體要求，從而造成臨床供應的血小板制品質(zhì)量參差不齊，影響臨床輸注效果。本研究旨在通過對血小板在保存過程中代謝指標、體外功能的系統(tǒng)監(jiān)測，全

2、面掌握血小板離體后代謝和體外功能的變化規(guī)律及其相互關(guān)系，遴選出可以全面有效反映血小板功能的指標，優(yōu)化血小板制備工藝，為建立起全面的血小板質(zhì)量標準體系奠定基礎(chǔ)。 一、機采血小板保存過程中代謝及體外功能變化機采血小板在體外液態(tài)保存9d過程中，乳酸與H<'+>逐漸堆積，pH值隨之下降；血小板低滲休克反應在7d時開始明顯下降；CD62p表達率隨保存天數(shù)逐步增高，凝血酶激活后CD62p再表達率逐步下降；血氣、葡萄糖、乳酸等代謝指標與血小板

3、低滲休克反應、CD62p的表達率及再表達率之間具有顯著相關(guān)性。通過對代謝指標的監(jiān)測可以間接反映機采血小板體外功能的變化，從而對血小板保存質(zhì)量作出系統(tǒng)評價。 二、白膜法手工制備濃縮血小板質(zhì)量評價及方法優(yōu)化第一次離心：四檔轉(zhuǎn)速、四個離心時間條件組合成16組離心條件。其中有四組離心條件所得血小板得率達到了國家標準，分別是2400rpm(1861g)：15min、17min；2600rpm(2184g)：15min、17min。而240

4、0 rpm(1861g)：15min離心條件所得的血小板初產(chǎn)品，在滿足血小板得率的基本質(zhì)量要求的情況下，血小板損傷相對最小，功能儲備最佳，因此選定2400rpm(1861g)：15min作為最佳的第一次離心條件。 第二次離心：三檔轉(zhuǎn)速、三個離心時間條件所得血小板終產(chǎn)品中血小板得率、白細胞殘留率、紅細胞殘留率結(jié)果表明：只有1100rpm(391g)：6min所得血小板得率、白細胞殘留率、紅細胞殘留率均符合國家標準，因此選定1100

5、 rpm(391g)：6min為最佳的第二次離心條件。 三、白膜法手工制備濃縮血小板與機采血小板質(zhì)量對比兩組的血小板得率、紅細胞殘留量、白細胞殘留量都分別達到相應的國家質(zhì)量標準，但在達到相同血小板計數(shù)的情況下，白膜法手工制備濃縮血小板組的紅細胞殘留量、白細胞殘留量明顯高于機采血小板組(P<0.01)；兩組的乳酸、血小板膜表面CD62p表達率均隨保存時間延長而升高；兩組問比較，白膜法手工制備濃縮血小板組CD62p表達率在保存0-5

6、d均高于機采血小板組(P<0.01)。兩組的pH值、凝血酶激活后CD62p再表達率均隨保存時間的延長而下降；兩組間比較，2-5d白膜法組pH值明顯低于機采血小板組(P<0.01)，0-5d白膜法組CD62p再表達率明顯低于機采血小板組(P<0.01)。機采血小板組血小板低滲休克反應水平在0-5d無明顯變化，而白膜法手工制備濃縮血小板組血小板低滲休克反應水平隨保存時間的延長而下降，保存1-5d時均明顯低于機采血小板組(P<0.01)。結(jié)論