自噬對巨噬細胞吞噬金黃色葡萄球菌的影響.pdf

1、目的：
　　支氣管哮喘是多種細胞和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病。近來研究發(fā)現肺泡巨噬細胞在肺部慢性疾病(例如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺病)中起著重要的作用,肺泡巨噬細胞是氣道炎癥性疾病的主要效應細胞之一,能有效地識別、結合并清除病原體,釋放多種生物活性物質參與氣道免疫防御反應,巨噬細胞受體介導變異原的識別是炎癥反應調節(jié)的重要機制。但是肺泡巨噬細胞在支氣管哮喘中的作用機制尚不清楚。本實驗假設巨噬細胞自噬過程可能影響其吞噬作用,探討

2、金黃色葡萄球菌(金葡菌,S.aureus)對巨噬細胞自噬的影響,并研究其在巨噬細胞吞噬病原微生物中的作用。
　　方法：
　　以小鼠單核巨噬細胞系RAW264.7為研究對象,以磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol3-Kinase,PI3K)抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)為干預藥物,實驗分對照組(Con)、實驗組(S.aureus)、3-MA抑制組(S.aureus+3

3、-MA)。金黃色葡萄球菌刺激細胞后,Western blot檢測自噬蛋白Beclin1、LC3以及吞噬相關蛋白Rac1的表達,激光共聚焦顯微鏡觀察自噬、吞噬現象。
　　結果：
　　1.金黃色葡萄球菌感染誘導RAW264.7自噬蛋白LC3II和PI3K在感染后1 h表達最強(P<0.05);
　　2.3-MA預處理組自噬相關蛋白Beclin1和LC3表達量顯著降低(P<0.05);自噬顆粒聚集顯著降低(P<0.05);<