褪黑素聯(lián)合順鉑、甲氨蝶呤對(duì)骨肉瘤SaOS-2細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:研究褪黑素(Melatonin，Mel)聯(lián)合DDP、MTX對(duì)骨肉瘤SaOS-2細(xì)胞增殖的影響，探討Mel與DDP、MTX的抗腫瘤效應(yīng)是否協(xié)同，為臨床使用褪黑素輔助治療骨肉瘤提供理論支持。
　　方法:將褪黑素、順鉑、甲氨蝶呤單獨(dú)或褪黑素與順鉑、甲氨蝶呤聯(lián)合作用于SaOS-2細(xì)胞一定時(shí)間后，(1)應(yīng)用cell counting kit-8試劑盒檢測(cè)各組藥物對(duì)細(xì)胞活性的影響，Compusyn軟件分析合并用藥效應(yīng)(Combinati

2、on index，CI)，CI小于1提示為協(xié)同效應(yīng)，CI等于1為疊加效應(yīng)，CI大于1為拮抗效應(yīng);流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)分別分析(2)各組細(xì)胞的周期分布比例以及(3)各組細(xì)胞的凋亡率。SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，組間比較用單因素方差分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:(1) Mel(0.5、1、2、4、5mmol/L)、DDP(6.67、16.67、33.33、66.66 umol/L)、MTX(0.1、0.5、1、2

3、、4 mmol/L)單獨(dú)作用于SaOS-2細(xì)胞48小時(shí)后，各實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞活性與對(duì)照組相比均下降(P＜0.05)，且藥物的作用效應(yīng)與劑量和時(shí)間相關(guān);Mel(1 mmol/L)與DDP(6.67、16.67、33.33、66.66 umol/L)聯(lián)用于SaOS-2細(xì)胞48h后，與單用DDP相比，細(xì)胞活性均下降(P＜0.05)，但Mel與較低濃度DDP(6.67、16.67、33.33 umol/L)聯(lián)用時(shí)Compusyn軟件分析結(jié)果呈拮抗效

4、應(yīng)(CI＞1)，而和較高濃度DDP（66.66 umol/L）聯(lián)用時(shí)呈協(xié)同效應(yīng)(CI＜1);Mel（1 mmol/L）與MTX(0.1、0.5、1、2、4 mmol/L)聯(lián)用時(shí)細(xì)胞活性下降(P＜0.05)，且較單用MTX時(shí)更明顯，Compusyn軟件分析結(jié)果呈協(xié)同效應(yīng)(CI＜1)。(2) Mel(1 mmol/L)組和Mel(1 mmol/L)+MTX(0.5 mmol/L)組作用于SaOS-2細(xì)胞48h后，G1期細(xì)胞比例明顯增多(P＜

5、0.05)，S期細(xì)胞比例明顯減少(P＜0.05)，MTX(0.5 mmol/L)組的S期細(xì)胞比例較對(duì)照組明顯增多(P＜0.05)。DDP(16.67 umol/L)組與Mel(1 mmol/L)+DDP(16.67 umol/L)組各期細(xì)胞比例與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P＞0.05)。(3) Mel(1mmol/L)、DDP(16.67 umol/L)、MTX(0.5 mmol/L)、Mel(1 mmol/L)+DDP(16.67umol

6、/L)和Mel(1 mmol/L)+MTX(0.5 mmol/L)組均能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(P＜0.05)，且Mel(1mmol/L)+DDP(16.67 umol/L)和Mel(1mmol/L)+ MTX（0.5 mmol/L）的合用組的細(xì)胞凋亡率較單藥組的明顯增加(P＜0.05)。
　　結(jié)論:Mel在體外抑制骨肉瘤SaOS-2細(xì)胞的活性，阻滯細(xì)胞周期于G1期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，有單獨(dú)抗腫瘤效應(yīng)，當(dāng)與較低濃度的DDP聯(lián)合應(yīng)用時(shí)呈拮抗效應(yīng)，