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1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文RGD肽抗纖維連接蛋白介導(dǎo)人膀胱癌細胞化療抵抗作用及其機制的研究姓名:廖國棟申請學(xué)位級別:博士專業(yè):外科學(xué)(泌尿外科學(xué))指導(dǎo)教師:沈周俊20070501浙江大學(xué)博士學(xué)位論文第一部分RGD肽抗纖維連接蛋白介導(dǎo)人膀胱癌5637細胞化療抵抗作用的實驗研究目的:探討FN是否能誘導(dǎo)人BTCC5637細胞產(chǎn)生藥物抵抗;RGD肽是否可在體外減少甚至逆轉(zhuǎn)FN介導(dǎo)的膀胱癌化療抵抗。方法:根據(jù)施加影響因素不同,實驗組細胞分為牛血清白蛋白
2、(bovineserumalbumin,BSA)組、FN組、RGD肽組、FNRGD組,其中1%的BSA、10叫g(shù)/mI的FN預(yù)先包被細胞培養(yǎng)板,孵育24h,加入不同濃度的絲裂霉素C(MitomycinC,MMC),用MTT比色法檢測作用后不同時間(2h、12h、24h)腫瘤細胞的生存率,用熒光染色觀察5637細胞具有的凋亡形態(tài)學(xué)改變。采用流式細胞儀(PI和annexinV雙染法)檢測細胞凋亡率的變化。結(jié)果:123不同MMC作用2h、12
3、h、24h后的5637細胞各組平均生存率:BSA組分別為7888%、5916%和4236%;FN組分別為8657%、6853%和4846%:RGD組分別為7251%、5104%和3723%;FNRGD組分別為7740%、5758%和4365%。FN組的細胞生存率最高(P005),RGD組的細胞生存率最低(P005)。MMC(50rrIg/L)作用2h后各組細胞在熒光顯微鏡下觀察調(diào)亡細胞比例,排列順序從高到低為RGD組、FNRGD組、BS
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