aFGF、bFGF在膀胱癌中的表達(dá)，對膀胱癌細(xì)胞株EJ細(xì)胞的作用及機(jī)制的研究.pdf

1、譬80∞13分類號(hào)墅塑!!審回鱔拜太拳單位代碼：lOl59學(xué)號(hào)：199917108博士學(xué)位論文題目：!篁墾!!壘里曼!查照咝瑾主鰒墨鎏：過壁壁痤麴照掛旦麴麈鰉絲星蕉扭笪笪班塞研究生：卜f：戈論文起止時(shí)間：2哩蘭旦=塑!生蘭旦4PRMll640培養(yǎng)基、新生牛血清購自Gibco公司。5MTT購自nuka公司。6(1一P2)ATP購自j匕京亞輝生物制品公司。二、實(shí)驗(yàn)方法1RT—PcR檢測aFGF、bFGF及FGFR一1的mRNA在正常及膀胱癌

2、組織中的表達(dá)。ISH檢測aFGF的mRNA在膀胱癌組織中的定位表達(dá)。2，用不同劑量的aFGF，bFGF，Genistein，PD98059刺激EJ細(xì)胞；MTr法檢測細(xì)胞增殖；TUNEL法檢泓細(xì)胞揭亡。3，檢測aFGF對EJ細(xì)胞的ERK活性的影響，推測腫瘤細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的途徑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果l，RT—PCR證實(shí)aFGF、bFGF及FGFR—l的mRNA在膀胱癌組織中的表達(dá)明顯高于它們在正常組織中的表達(dá)(P001)，且與分期呈正相關(guān)。ISH同樣證

3、實(shí)aFGFmRNA的表達(dá)與腫瘤分期呈正相關(guān)，aFcF的染色主要位于腫瘤的間質(zhì)，以血管周圍為著。2，aFGF、bFGF均可明顯地促進(jìn)EJ細(xì)胞的增殖，增殖程度與藥物濃度成正相關(guān)(pO05)；ce幽te殛對日細(xì)胞增殖有抑制作用(pO05)，而且對于aFCF、bFGF誘導(dǎo)增殖的EJ細(xì)胞的抑制作用更加明顯。PD98059對EJ細(xì)胞的增殖同樣有抑制作用，而且對于aFGF誘導(dǎo)增殖的EJ細(xì)胞的抑制作用更為顯著(p005)。TuNEL法發(fā)現(xiàn)Ge玎jste

4、in能促進(jìn)EJ細(xì)胞的凋亡。3aFGF刺激后，EJ細(xì)胞的ERK活性明顯增強(qiáng)，與aFGF呈劑量依賴關(guān)系。討論膀胱移行細(xì)胞癌是常見的惡性腫瘤，在我國其發(fā)病率居泌尿外科惡性腫瘤之首，雖然手術(shù)技巧和化療方案不斷進(jìn)步，但是其治療效果仍不十分滿意。淺表性腫瘤容易復(fù)發(fā)，兩一旦發(fā)展為侵襲性腫瘤或出現(xiàn)轉(zhuǎn)移則預(yù)后很差。因此非常有必要深入了解其病因和發(fā)病機(jī)制，為膀胱腫瘤的治療提供新的嘗試。近來的研究顯示酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子