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文檔簡介
1、目的:探索牛乳鐵蛋白抗菌肽(LfcinB)抗人肺癌細胞功能及其作用機制。
方法:體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細胞株,實驗分為:陰性對照組、LfcinB處理組和陽性對照組。采用MTT法檢測牛乳鐵蛋白抗菌肽對人肺腺癌A549細胞增殖的影響,流式細胞儀測定細胞周期和凋亡率。RT-PCR法檢測Bax、Bcl-2、Caspase-3mRNA水平的表達量;Westernblot方法檢測Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表達量。
2、 結果:1、與陰性對照組相比,不同濃度的LfcinB作用48h后均對肺癌A549細胞增殖有抑制作用,其中以10-2g/L濃度的乳鐵蛋白抗菌肽的抑制率最高。2、與陰性對照組相比,不同濃度的LfcinB作用于肺癌A549細胞24、48和72h后,G0/G1期細胞略有減少,S期細胞逐漸增多,G2/M期細胞略有減少,且在72h結果最為顯著(P<0.01)。LfcinB在10-6~10-2mg/ml濃度范圍內(nèi)作用48、72h均可誘導肺癌A549
3、細胞凋亡,隨著藥物濃度增高,誘導凋亡作用加重,有明顯的劑量效應關系。3、RT-PCR和Westernblot結果表明:與陰性對照組相比,Bax的表達隨著LfcinB濃度升高而升高;Bcl-2的表達隨著LfcinB濃度升高而降低;Caspase-3的表達隨著LfcinB濃度升高而升高。
結論:LfcinB能顯著抑制人肺腺癌A549細胞增殖,使細胞阻滯于S期,并誘導細胞凋亡。LfcinB通過促進細胞中Bax的表達及抑制Bcl-2的
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