原發(fā)瘤切除對荷人骨肉瘤裸鼠肺轉移的影響.pdf

1、目的：在構建荷人骨肉瘤裸鼠模型的基礎上，觀察原發(fā)瘤切除前后裸鼠體內血管生成水平的變化及其對骨肉瘤肺轉移的影響，為研究伴發(fā)性腫瘤抵抗機制提供實驗學基礎。
　　 方法：采用骨肉瘤細胞懸液法構建荷人骨肉瘤裸小鼠模型。將0.2ml骨肉瘤細胞懸液(約2.0×106個細胞)注射至裸鼠左前肢皮下，接種兩周后開始分組，左前肢皮下腫瘤作為原發(fā)瘤。1、原發(fā)瘤切除對裸鼠體內血管生成的影響。①原發(fā)瘤切除前后VEGF、內皮抑素的變化?？瞻捉M、對照組和實驗

2、組各20只，成瘤后第7天、第14天、第21天每組取5只處死抽血。第21天，實驗組剩余5只行左前肢截肢術(切除原發(fā)瘤)，對照組剩余5只行右前肢截肢術，空白組剩余5只不做處理，一周后全部處死抽血。用ELISA檢測血清中內皮抑素和VEGF的濃度。②原發(fā)瘤切除前后裸鼠體內Matrigel膠體中血紅蛋白濃度的變化?？瞻捉M、對照組和實驗組各20只，成瘤后第7天、第14天、第21天每組取5只在腹部皮下注射Matrigel膠體0.5ml(含有bFGF2

3、00ng，肝素50u)，分別在注射一周后處死取出膠體。第21天，對照組與實驗組剩余裸鼠行手術處理(手術同上)，并在腹部皮下注射Matrigel膠體，空白組僅注射膠體，一周后全部處死取出膠體。用HiCN法檢測其中血紅蛋白的濃度。2、原發(fā)瘤切除對骨肉瘤肺轉移的影響。空白組、對照組和實驗組各20只，接種腫瘤兩周后，實驗組行左前肢截肢術，對照組行右前肢截肢術，空白組不做手術處理，兩周后處死裸鼠解剖觀察有無肺部轉移，如有肺轉移則計數(shù)肺轉移結節(jié)并分

4、級。
　　 結果：1、空白組、對照組裸鼠第7、14、21、28天血清中內皮抑素、VEGF的濃度無明顯差異；Matrigel小體中的血紅蛋白濃度也無明顯差異。術后，原發(fā)瘤切除組血清中內皮抑素、VEGF的濃度與未切除組(空白組、對照組)相比有明顯的下降(內皮抑素為40.77±5.41ng/ml對123.18±5.94ng/ml、128.06±4.52ng/ml，P＜0.01；VEGF為71.43±9.15pg/ml對115.81±4

5、.38pg/ml、111.68±12.26pg/ml，P＜0.01)；原發(fā)瘤切除組Matrigel小體中的血紅蛋白濃度與未切除組相比有明顯的升高(36.55±2.35g/L對16.84±1.15g/L、16.29±1.10g/L，P＜0.01)。2、原發(fā)瘤切除組的肺轉移率與未切除組相比有明顯提高(80％對40％、35％，P＜0.05)。
　　 結論：1、荷人骨肉瘤裸鼠原發(fā)瘤切除后，循環(huán)中的內皮抑素與VEGF水平都有明顯下降，且內