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文檔簡介
1、目的:
探討SpA刺激單核巨噬細胞后,對其表達早期致炎因子TNF-α、IL-1和IL-6的影響及規(guī)律,以了解金黃色葡萄球菌性膿毒癥的發(fā)生機制,為尋找治療金黃色葡萄球菌性膿毒癥的新靶點提供理論依據(jù)。
方法:
用S1800按本室常規(guī)制備SpA。以THP-1細胞為靶細胞,經(jīng)PMA誘導(dǎo)為單核巨噬細胞后與一定濃度SpA培養(yǎng)不同時間,用MTT法測定SpA對THP-1細胞增殖的影響;用ELISA測定培養(yǎng)上清液中TNF-α
2、、IL-1和IL-6的含量;用RT-PCR檢測沉淀細胞TNF-α、IL-1和IL-6相應(yīng)mRNA的表達。并對結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。
結(jié)果:
1.MTT結(jié)果顯示,SpA對THP-1細胞增殖的影響與其作用劑量有關(guān),100μg/mLSpA對其增殖作用最明顯,100μg/mL與500μg/mL組間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。
2.SpA刺激可促進巨噬細胞分泌TNF-α、IL-1和IL-6及表達相應(yīng)mRNA,且呈一定劑量—效應(yīng)和
3、時間—效應(yīng)關(guān)系。100μg/mL SpA刺激作用較明顯(P<0.01),100μg/mL與500μg/mLSpA刺激作用無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。SpA刺激巨噬細胞后TNF-α、IL-1和IL-6的表達12h達高峰,SpA刺激12h與24h結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。SpA刺激組單核巨噬細胞表達和釋放TNF-а、IL-1和IL-6的時間點與早期致炎細胞因子分泌特點相一致;SpA刺激組與對照組比較,刺激組TNF-а、IL
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