強骨顆粒含藥血清對破骨細胞增殖及活性的影響.pdf

1、目的：本實驗通過體外分離、培養(yǎng)新生大鼠破骨細胞，研究大鼠的含強骨顆粒藥物血清對體外培養(yǎng)的破骨細胞增殖及骨吸收活性的影響，從細胞生物學(xué)角度深入研究中藥強骨顆粒對骨質(zhì)疏松癥的治療作用機理，探討強骨顆粒是否是通過抑制破骨細胞的增殖、降低破骨細胞的骨吸收活性來發(fā)揮其抗骨質(zhì)疏松的作用，為強骨顆粒在預(yù)防及治療骨質(zhì)疏松癥提供理論和實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.破骨細胞制備：從剛出生的大鼠骨髓腔內(nèi)進行破骨細胞的分離、純化、鑒定和傳

2、代培養(yǎng)。
　　 2.載藥血清制備：應(yīng)用強骨顆粒高劑量 (H)、中劑量 (M)和低劑量 (L)、尼爾雌醇（E）及普通食物(N)分別喂養(yǎng)五組大鼠，以獲得不同的藥物血清及對照組血清。
　　 3.體外觀察不同稀釋濃度的載藥血清及陰性對照組血清對破骨細胞增殖的影響（TRAP+計數(shù)法）。
　　 4.體外觀察置于不同稀釋濃度載藥血清及陰性對照組血清里的破骨細胞對骨片吸收形成吸收陷窩的數(shù)目的影響。
　　 結(jié)果：
　

3、　 1.通過小鼠四肢骨機械分離、純化、傳代培養(yǎng)，經(jīng)抗酒石酸酸性磷酸酶驗證為破骨細胞，且可獲得較高濃度和一定數(shù)量。
　　 2.強骨顆粒高劑量組、尼爾雌醇組含藥血清培養(yǎng)的破骨細胞細胞數(shù)明顯減少，且與中、低劑量組、陰性對照組相比，存在顯著性差異。中、低劑量組與陰性對照組相比，也使破骨細胞的數(shù)量減少，但不存在顯著性差異。
　　 3.強骨顆粒高劑量組、尼爾雌醇組含藥血清培養(yǎng)的破骨細胞作用骨片而形成的骨陷窩數(shù)目明顯減少，且與中、低