當(dāng)歸貝母苦參丸含藥血清對胃癌細胞增殖及侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、目的:通過研究當(dāng)歸貝母苦參丸含藥血清對胃癌 SGC-7901、MKN-45增殖及侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,探討當(dāng)歸貝母苦參丸含藥血清抑制胃癌 SGC-7901、MKN-45細胞增殖的作用及其相關(guān)機制;
　　方法:不同濃度含藥血清處理 SGC-7901、MKN-45細胞后,(1)MTT法測定細胞活力;(2)流式細胞術(shù)檢測細胞周期;(3)Trans-well侵襲轉(zhuǎn)移實驗及劃痕實驗觀察侵襲能力轉(zhuǎn)移能力;(4)qRT-PCR技術(shù)檢測 COX-2

2、、BCL-2、BAX、PTEN基因表達;(5)免疫細胞化學(xué)技術(shù)檢測 COX-2、BAX、PTEN蛋白表達情況。
　　結(jié)果:(1)不用濃度的當(dāng)歸貝母苦參丸含藥血清均能抑制細胞增殖,在10％濃度時抑制作用達最大值,作用于 SGC-7901細胞72h的抑制率分別為:高劑量組達到34.51%,中劑量組為31.69%,低劑量組為19.78%;作用于 MKN-45細胞組72h的抑制率分別為:高劑量組35.66%,中劑量組34.27%,低劑量組

3、22.38%,差異異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　(2)流式細胞術(shù)檢測顯示:高劑量組作用 SGC-7901細胞 S期比例由46.5%下降到13.7%,G1/G2期比例由53.5%上升到74.1%;高劑量組作用 MKN-45細胞 S期比例由44.9%下降到9.94%,G1/G2期比例由55.1上升到72.1%;
　　(3)侵襲轉(zhuǎn)移實驗結(jié)果示:高劑量組作用 SGC-7901細胞侵襲能力下降40.48%、轉(zhuǎn)移能力下降46.8

4、8%、遷移能力下降41.30%;高劑量組作用 MKN-45細胞侵襲能力下降移37.23%、轉(zhuǎn)移能力下降50%,遷移能力下降36.46%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　(4)qRT-PCR結(jié)果示:SGC-7901細胞中高劑量組 COX-2和 BCL-2 mRNA的表達量分別下降68%、77%;BAX和 PTEN mRNA的表達量分別升高99.7%和85.6%;MKN-45細胞中高劑量組 COX-2和 BCL-2 mRNA的

5、表達量分別下降90%和91%,BAX和 PTEN mRNA的表達量分別升高98.65%和89.72%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　(5)免疫細胞化學(xué)染色顯示:含藥血清可以降低 SGC-7901細胞 COX-2的蛋白平均灰度值升高,陽性表達率下降;BAX和 PTEN的蛋白平均灰度值下降,其陽性表達率表達率升高;含藥血清可以降低 MKN-45細胞細胞 COX-2的蛋白平均灰度值升高,陽性表達率下降,BAX和 PTEN的蛋白