熱休克蛋白和p53在BK通道介導的腫瘤細胞凋亡與增殖抑制中的作用.pdf

1、課題一 鉀離子通道阻滯劑對人宮頸癌HeLa細胞增殖的影響 目的：多種鉀離子通道涉及惡性腫瘤細胞增殖的調控，通過觀察不同鉀離子通道阻滯劑對人宮頸癌HeLa細胞增殖的影響，初步探討不同亞型鉀通道，特別是大電導鈣激活型鉀通道在宮頸癌細胞增殖中的作用，為進一步研究鉀通道參與惡性腫瘤細胞增殖調控的機制奠定基礎。 材料和方法：以不同濃度四乙胺、粉防已堿及格列苯脲分別作用于體外培養(yǎng)的人宮頸癌細胞株HeLa，通過MTT法、細胞D

2、NA瓊脂糖凝膠電泳及流式細胞術，分別檢測不同鉀通道阻滯劑對HeLa細胞增殖、細胞凋亡及細胞周期的影響，并以免疫印跡法檢測四乙胺、粉防已堿和格列苯脲對p53、p21及Bax表達水平的影響，初步探討鉀通道阻滯劑抑制腫瘤細胞增殖及誘導其凋亡的機制。結果：四乙胺、粉防已堿可在體外抑制HeLa細胞增殖，其增殖抑制效應具有時間依賴和劑量依賴的特點，并能誘導腫瘤細胞凋亡、使細胞周期阻滯于G0/G1期；格列苯脲則對HeLa細胞的增殖無影響。四乙胺與粉防

3、已堿可上調p53、p21及Bax蛋白的表達。 結論：大電導鈣激活型鉀通道對人宮頸癌細胞增殖的調控具有重要作用，其抗腫瘤效應可能與上調p53、p21及Bax蛋白表達有關。大電導鈣激活型鉀通道可能成為潛在的惡性腫瘤治療靶點。 課題二 熱休克蛋白和p53在鉀通道介導的腫瘤細胞凋亡與增殖中的作用 目的：多種鉀離子通道涉及惡性腫瘤細胞增殖的調控，通過探討B(tài)K通道參與惡性腫瘤細胞增殖與凋亡的調控機制，為進一步研究鉀通

4、道參與惡性腫瘤細胞增殖調控的機制奠定基礎。 材料和方法：通過觀察不同鉀離子通道阻滯劑對人宮頸癌HeLa細胞、人卵巢癌A2780細胞增殖的影響，以不同濃度四乙胺、粉防已堿及格列苯脲分別作用于體外培養(yǎng)的人宮頸癌細胞株HeLa及人卵巢癌A2780細胞，通過MTT法、細胞DNA瓊脂糖凝膠電泳、Hoechst33258染色及流式細胞術，分別檢測不同鉀通道阻滯劑對HeLa細胞增殖、細胞凋亡及細胞周期的影響，并以免疫印跡法檢測四乙胺、粉防已堿

5、和格列苯脲對p53、p21、Bax、HPV18E6、HSP70、HSP90α及HSP90β表達水平的影響，并通過全細胞膜片鉗技術驗證腫瘤細胞膜是否存在大電導鈣激活型鉀通道，初步探討鉀通道阻滯劑抑制腫瘤細胞增殖及誘導其凋亡的機制。 結果：四乙胺、粉防已堿可在體外抑制HeLa細胞增殖，其增殖抑制效應具有時間依賴和劑量依賴的特點，并能誘導腫瘤細胞凋亡、使細胞周期阻滯于G0/G1期；格列苯脲則對HeLa細胞的增殖無影響。四乙胺與粉防已堿