葡萄籽原花青素對(duì)2型糖尿病大鼠胰島細(xì)胞凋亡的干預(yù)機(jī)理研究.pdf

1、目的：通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法，探討葡萄籽原花青素(GSPE)對(duì)2型糖尿病(T2DM)致大鼠胰島細(xì)胞凋亡的干預(yù)機(jī)理。 方法：取SPF級(jí)SD雄性大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，給予高脂飲食后腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型。動(dòng)物造模成功后分4組。(1)普食對(duì)照組：普通飲食喂養(yǎng)，以消毒的自來(lái)水灌胃干預(yù)。(2)糖尿病對(duì)照組：高脂飼料喂養(yǎng)，注射STZ成模后以消毒的自來(lái)水灌胃干預(yù)。(3)治療1組[GSPE(250mg/kg.d)劑量組

2、]：高脂飼料喂養(yǎng)，注射STZ成模后給予高劑量GSPE灌胃干預(yù)。(4)治療2組[GSPE(50mg/kg.d)劑量組]：高脂飼料喂養(yǎng)，注射STZ成模后給予低劑量GSPE灌胃干預(yù)。各組灌胃干預(yù)4周。大鼠高脂喂飼結(jié)束后采血檢測(cè)空腹血糖(FBG)、空腹血清胰島素(FINS)，血甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物終止實(shí)驗(yàn)后，即麻醉大鼠，取血清和胰腺組織，檢測(cè)以下指標(biāo)：制作光鏡病理切片做HE染色，觀(guān)察胰腺組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)；TUNEL法

3、觀(guān)察胰島細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化及細(xì)胞凋亡率；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)細(xì)胞死亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)效應(yīng)酶caspase-3在胰島中的表達(dá)情況；檢測(cè)血清中超氧化物歧化酶(SOD)、還原型谷胱甘肽(GSH)的活力及血清中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量；檢測(cè)血清中TNF-α、IFN-γ的含量。 結(jié)果：(1)本實(shí)驗(yàn)成功的建立了2型糖尿病動(dòng)物模型。(2)2型糖尿病大鼠發(fā)生胰島細(xì)胞凋亡。(3)2型糖尿病大鼠SOD的活力和GSH的活性降低，MDA、NO的

4、產(chǎn)量升高，與普食對(duì)照組相比具有顯著性差異(P<0.05)；GSPE能改善糖尿病引起上述指標(biāo)的異常，與糖尿病對(duì)照組相比較，具有顯著性差異(P<0.05)，(4)糖尿病時(shí)大鼠血清中的TNF-α，IFN-γ等促凋亡因子增加，與正常對(duì)照組大鼠血清中TNF-α、IFN-γ的水平相比較有顯著性差異(P<0.05)，而GSPE能抑制上述因子的釋放，與糖尿病對(duì)照組相比較有顯著性差異(P<0.05)。(5) GSPE可以拮抗2型糖尿病時(shí)胰島細(xì)胞的凋亡，降