喉癌裸鼠動物模型中播散腫瘤細胞的相關性研究.pdf

1、目的：建立喉癌裸鼠腫瘤模型，進行外周血播散腫瘤細胞（disseminated tumor cell，DTC）和腫瘤組織突變型p53基因的檢測，判斷兩者之間的相關性及早期預示腫瘤遠處轉移和預后的價值；對DTC陽性組給予小劑量的紫杉醇治療，判斷其殺滅DTC、延長生存期、減少腫瘤遠處轉移的療效。 方法：70只裸鼠，隨機選擇10為對照組，其余為實驗組建立裸鼠喉癌腫瘤模型，采用套式PCR法，以CK19mRNA為標記物于腫瘤種植成功后第10

2、周檢測腫瘤組及對照組裸鼠外周血中的DTC；以RT-PCR和免疫組化法檢測腫瘤組織中突變型p53蛋白表達情況，觀察DTC與生存期及遠處器官轉移的關系。DTC陽性組給予小劑量的紫杉醇治療，判斷其殺滅DTC、延長生存期、減少腫瘤遠處轉移的療效。待裸鼠死亡后解剖肝、肺及淋巴結，采用連續(xù)病理切片HE染色證實是否發(fā)生轉移。 結果：腫瘤組DTC陽性率為66.67％（40/60），對照組為陰性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。腫瘤組織中突變型

3、p53陽性率為60.0％（36/60）；DTC陽性組中，P53也為陽性者為75.0％（30/40），而DTC陰性組中，P53蛋白陽性者為30.0％（6/20），喉癌腫瘤模型中p53與DTC的表達之間存在關聯(lián)X2=14.17，P<0.005，r=0.437，P<0.05，DTC和p53蛋白在喉癌腫瘤模型的表達呈正相關。DTC與突變型p53都為陽性組中位生存期為34周，陰性組為43周，（P<0.05），log-rank檢驗=4.56，P=0

4、.0327，生存差異有統(tǒng)計學意義。DTC與突變型p53陽性組發(fā)生遠處器官轉移率為42.9％（6/14），其中淋巴結轉移4例，肝臟轉移1例，肺轉移1例：陰性組見2例淋巴結轉移，轉移率14.3％（2/14），（P<0.05）差異有統(tǒng)計學意義。紫杉醇組DTC再次檢測為陰性，生理鹽水組仍為陽性。生理鹽水空白組1年帶瘤生存率23.1％（3/13），轉移率為53.8％（7/13）；小劑量紫杉醇治療組生存率為53.8％（7/13），轉移率為14.3％

5、（2/13）；DTC陰性組生存率為46.2％（6/13），未見轉移，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析，生理鹽水空白對照組中位生存期為30周，和小劑量紫杉醇組經log-rank檢驗=6.171，p=0.013，小劑量紫杉醇能顯著提高動物模型的生存時間（P<0.05）：生理鹽水空白組和DTC陰性組經log-rank檢驗=6.976，p=0.008，提示DTC陽性的動物模型其生存時間較陰性組顯著降低（P<0.