裸鼠結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型的建立.pdf

1、研究背景及目的:
　　結(jié)直腸癌是一種常見的嚴(yán)重威脅人類生命健康的惡性腫瘤，位居男性惡性腫瘤第四位，女性惡性腫瘤第三位，每年有超過一百萬人被新診斷為結(jié)直腸癌;近年來隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、生活方式的改變尤其是飲食結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)變，結(jié)直腸癌的發(fā)病率與死亡率呈逐年上升的趨勢。結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的建立，對于探索結(jié)直腸癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移的機(jī)制，腫瘤微環(huán)境的形成與發(fā)展以及正確評估各種藥物及治療方案的療效等都具有重要意義。本研究擬建立一種穩(wěn)定的裸鼠大腸癌肝轉(zhuǎn)

2、移模型，以期在此平臺(tái)上創(chuàng)建高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系，便于后期進(jìn)行相關(guān)分子機(jī)制及藥物療效試驗(yàn)、腫瘤微環(huán)境等方向的研究，并期待結(jié)合臨床，指導(dǎo)治療。
　　方法:
　　1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn):(1)主要方法:裸鼠盲腸漿膜下腫瘤細(xì)胞注射法:將CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞懸液0.05ml（1*105/只）注射入BALB/C裸鼠盲腸壁，建立裸鼠盲腸原位腫瘤。
　　(2)輔助方法:裸鼠皮下成瘤法:將CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞懸液0.2ml（1*106/只）注

3、射入BALB/C裸鼠皮下，觀察腫瘤的生長及比較各代腫瘤細(xì)胞的成瘤效率。
　　2、細(xì)胞實(shí)驗(yàn):(1)轉(zhuǎn)移瘤組織直接剪碎培養(yǎng)法:此方法一般用于數(shù)量較少且瘤徑相對較大之肝臟轉(zhuǎn)移瘤的原代培養(yǎng)。
　　(2):鼠肝臟切取消化培養(yǎng)法:此方法適合于較彌漫性分布且瘤徑普遍較小之肝臟轉(zhuǎn)移瘤的原代培養(yǎng)。
　　結(jié)果：
　　(1)成功建立CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞盲腸原位結(jié)直腸腫瘤模型;
　　(2)成功建立CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞盲

4、腸至肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型;
　　(3)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞第一代肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞系CT26.WT M1;
　　(4)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞第二代肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞系CT26.WT M2;
　　(5)成功培養(yǎng)出CT26.WT鼠結(jié)腸癌細(xì)胞第三代肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞系CT26.WT M3。
　　(6)成功完成M0、M1、M2、M3四代細(xì)胞之間增殖與轉(zhuǎn)移能力的初步評價(jià)。
　　結(jié)論:
　　(1)從方法學(xué)角度來說