2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、DNA疫苗一直是腫瘤疫苗研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。然而,DNA疫苗的潛力有待進(jìn)一步提高。在本研究中,聯(lián)合應(yīng)用次級淋巴組織趨化性細(xì)胞因子(SLC)和IgGFc的佐劑效應(yīng)來提高DNA疫苗的潛力。以HPV16的E7抗原為模型抗原,以pShuttle-CMV為真核表達(dá)載體,在E7基因的5’端連接SLC,在其3’端連接Fc基因,構(gòu)建了嵌合體DNA疫苗pSLC-E7-Fc,同時(shí),構(gòu)建了pE7-Fc、pSLC-E7、pE7、pSLC、pFc和pCMV六種對照質(zhì)

2、粒。 利用RT-PCR和WesternBlotting,證實(shí)了包括pSLC-E7-Fc在內(nèi)的六種質(zhì)粒都能被真核細(xì)胞有效表達(dá)。 以E7陽性的免疫原性好的C3細(xì)胞和免疫原性差的TC-1細(xì)胞為模型,進(jìn)行了pSLC-E7-Fc疫苗的腫瘤預(yù)防與治療實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,在C3腫瘤治療實(shí)驗(yàn)中(初始治療時(shí)腫瘤大小為6mmx6mm),pSLC-E7-Fc免疫使100%的小鼠腫瘤完全消退,并長期生存;而其他組最高的腫瘤完全消退率未超過50%。在

3、TC-1腫瘤預(yù)防實(shí)驗(yàn)中,pSLC-E7-Fc免疫使100%的小鼠不長瘤,而所有對照質(zhì)粒免疫的小鼠全部成瘤;用三倍劑量的TC-1細(xì)胞對不長瘤的小鼠進(jìn)行再攻擊,仍不出瘤,而對照組出瘤率為100%。在皮下接種TC-1細(xì)胞15天后開始免疫治療,pSLC-E7-Fc疫苗使72%的小鼠腫瘤完全消退,并長期存活。而pE7-Fc免疫僅使28%的小鼠腫瘤完全消退,其他對照組腫瘤持續(xù)生長,小鼠全部死亡。當(dāng)皮下接種TC-1細(xì)胞30天后開始免疫,pE7-Fc免

4、疫組平均生存期為71天,而pSLC-E7-Fc免疫組平均生存期延長至91天(p<0.01)。在TC-1肺轉(zhuǎn)移治療實(shí)驗(yàn)中,與pE7-Fc相比,pSLC-E7-Fc免疫顯著減少了肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)(p<0.01)。以上結(jié)果說明,與對照相比,pSLC-E7-Fc能更有效地預(yù)防和治療E7陽性的C3和TC-1腫瘤。 為分析pSLC-E7-Fc疫苗抗腫瘤效應(yīng)的機(jī)制,進(jìn)行了體外淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、CTL活性檢測、抗體滴度檢測以及體內(nèi)CD4和CD8淋巴

5、細(xì)胞刪除實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,與對照質(zhì)粒相比,pSLC-E7-Fc免疫的小鼠顯示了最高的E7特異的淋巴細(xì)胞增殖能力、CTL活性和抗體應(yīng)答,這說明pSLC-E7-Fc可誘導(dǎo)有效的抗原特異性的細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答。而且,免疫前體內(nèi)刪除和免疫后體外刪除CD4或CD8淋巴細(xì)胞表明,CD8淋巴細(xì)胞是pSLC-E7-Fc抗腫瘤效應(yīng)的主要參與者。 為分析SLC在pSLC-E7-Fc誘導(dǎo)的細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答中所起的作用,進(jìn)行了SLC-E7-Fc融合蛋白

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