細(xì)胞支架復(fù)合體促進(jìn)大鼠腹部預(yù)構(gòu)皮瓣存活及其再血管化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討通過(guò)構(gòu)建大鼠羊膜上皮細(xì)胞膠原海綿支架復(fù)合體,觀察預(yù)構(gòu)皮瓣血管束附近細(xì)胞支架復(fù)合體的作用,及其對(duì)預(yù)構(gòu)皮瓣成活影響的實(shí)驗(yàn)研究。
　　方法:體外培養(yǎng)羊膜上皮細(xì)胞,將第3代的大鼠羊膜上皮細(xì)胞與膠原海綿構(gòu)筑成細(xì)胞支架復(fù)合體后,光鏡下及熒光標(biāo)記法分別觀察細(xì)胞種植前后的生長(zhǎng)增殖情況;ELISA法檢測(cè)羊膜上皮細(xì)胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量,并通過(guò)熒光標(biāo)記技術(shù)觀察羊膜上皮細(xì)胞支架植于體內(nèi)后細(xì)胞的存活情況;同時(shí)將軟骨細(xì)胞植

2、于膠原蛋白海綿支架。實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、軟骨細(xì)胞組、羊膜上皮細(xì)胞組和正常對(duì)照組。一期手術(shù)時(shí),空白對(duì)照組在預(yù)構(gòu)皮瓣血管神經(jīng)束的兩側(cè)植入膠原海綿空支架,軟骨細(xì)胞組和羊膜上皮細(xì)胞組均植入帶有相應(yīng)細(xì)胞的膠原海綿支架復(fù)合體。術(shù)后第7、14天各組分別取皮瓣組織行促血管生成因子的ELISA檢測(cè)。二期手術(shù)時(shí),將皮瓣四邊掀起后原位縫合,術(shù)后1周比較各組皮瓣存活情況,并取存活部位軟組織測(cè)定微血管數(shù)目及密度,進(jìn)行分析。正常對(duì)照組大鼠未經(jīng)任何手術(shù)過(guò)程,當(dāng)其它三

3、組大鼠分別經(jīng)過(guò)兩期手術(shù)后,正常對(duì)照組大鼠取腹部相應(yīng)位置的皮膚軟組織作相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)。
　　結(jié)果:羊膜上皮細(xì)胞在膠原海綿支架上生長(zhǎng)情況良好,細(xì)胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量隨時(shí)間增長(zhǎng)呈不斷上升趨勢(shì),將細(xì)胞支架移植于體內(nèi)后經(jīng)過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍存活良好。組織內(nèi)各因子含量以羊膜上皮細(xì)胞組最高,其余依次為正常對(duì)照組、空白對(duì)照組及軟骨細(xì)胞組,各組之間均有差異。并且各組14天較7天的分泌量無(wú)明顯下降。空白對(duì)照組與軟骨細(xì)胞組間皮瓣存